应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 关于筛选和鉴定细菌(16S rRNA)
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
362/4返回列表上一页1234下一页
查看: 4590  |  回复: 35
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

aegeansea

金虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 西门炊饼 at 2011-08-31 08:49:51:
我的目的就是把样品里的菌（比如说共50种菌）能够比较完整的分离出来（分离出来30种或40种）

测序只能鉴定 不能分离
要分离的话 还是要克隆的 这个工作没法省
赞一下 回复此楼
11楼2011-08-31 10:34:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yemuren

铁杆木虫 (正式写手)
首先，我同意楼主先用16s来鉴定，一般情况下16s能鉴定到属，得到想要的后再用生理生化鉴定，工作量会小很多。但是，LZ的分子鉴定方法有待商榷，菌落不纯，或者不是单克隆，那么测序结果就会出现双峰或杂峰，这样的结果是无效的，所以建议LZ还是划线纯化一下，细菌还是比较好纯化的。
赞一下(1人) 回复此楼
我的专长叫做流浪，所以我就做了流氓~
12楼2011-08-31 10:38:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

西门炊饼

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
12楼: Originally posted by yemuren at 2011-08-31 10:38:35:
首先，我同意楼主先用16s来鉴定，一般情况下16s能鉴定到属，得到想要的后再用生理生化鉴定，工作量会小很多。但是，LZ的分子鉴定方法有待商榷，菌落不纯，或者不是单克隆，那么测序结果就会出现双峰或杂峰，这样的 ...

我是这么想的
如果先做生化鉴定：
比如说，用样品我划了一块板，假设这块板上有50个单克隆菌落，有20种菌，如果我一种菌都不想漏过，需要每个单克隆菌落都划板，需要划50块板，到最后需要做50个生化鉴定。如果我有10个样（当然远不止这么多），就得划2000+（50*10再纯化三代）块板，500次生化鉴定。这样的工作量和花费肯定不允许，那么我只能一个样挑15个左右单克隆划板，这样，很可能我错过了新细菌和我感兴趣的菌。

如果先扩增16S rRNA：同样地情况下，50个菌落我全部挑到EP管里摇菌，最后测序，保留菌液，分析测序结果后，筛选需要的菌，保留的菌液再去划线做生化鉴定。虽然没经过纯化三代，也许里面有相当一部分不纯，但也比挑10个划线得到的菌多，更完整。
赞一下 回复此楼
13楼2011-09-01 11:25:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

西门炊饼

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
11楼: Originally posted by aegeansea at 2011-08-31 10:34:36:
测序只能鉴定 不能分离
要分离的话 还是要克隆的 这个工作没法省

我是这么想的
如果先做生化鉴定：
比如说，用样品我划了一块板，假设这块板上有50个单克隆菌落，有20种菌，如果我一种菌都不想漏过，需要每个单克隆菌落都划板，需要划50块板，到最后需要做50个生化鉴定。如果我有10个样（当然远不止这么多），就得划2000+（50*10再纯化三代）块板，500次生化鉴定。这样的工作量和花费肯定不允许，那么我只能一个样挑15个左右单克隆划板，这样，很可能我错过了新细菌和我感兴趣的菌。

如果先扩增16S rRNA：同样地情况下，50个菌落我全部挑到EP管里摇菌，最后测序，保留菌液，分析测序结果后，筛选需要的菌，保留的菌液再去划线做生化鉴定。虽然没经过纯化三代，也许里面有相当一部分不纯，但也比挑10个划线得到的菌多，更完整。
赞一下 回复此楼
14楼2011-09-01 11:26:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

quiller2000

木虫 (著名写手)
这个，好吧！
回复此楼
致良知
15楼2011-09-02 00:39:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

abduwaly

新虫 (初入文坛)
你好，微生物分离鉴定可分为可培养微生物鉴定和不可培养微生物鉴定。可培养法是需要必须经过细心培养和纯化。而不可培养法不需要分离，只是把总DNA提取进行PAGE电泳即可得到样品中的细菌类型。但不能获得菌落的信息。从你的描述来看你是想做可培养细菌的鉴定，那么必须经过细心培养，纯化和鉴定。如果你的目的是分离有意义的细菌那么要用两种以上的培养基，觉得工作量多可选择一种培养基（注意不要用LB和TSA培养基），最好是适合你的样品生长的培养基（需自己查资料）。另外我建议你你所说的VITEK2，COMPAT等仪器是人体微生物检验专用，含有少数工业微生物，不适合土壤微生物。所以你要考虑你的样品和你想获得什么类型的微生物。
赞一下(2人) 回复此楼
16楼2011-09-02 01:47:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

西门炊饼

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
16楼: Originally posted by abduwaly at 2011-09-02 01:47:15:
你好，微生物分离鉴定可分为可培养微生物鉴定和不可培养微生物鉴定。可培养法是需要必须经过细心培养和纯化。而不可培养法不需要分离，只是把总DNA提取进行PAGE电泳即可得到样品中的细菌类型。但不能获得菌落的信 ...

谢谢，谢谢，其实我不是微生物专业的，我是昆虫专业的，不幸给硬拉过来做微生物。我的样品是苍蝇携带菌。
赞一下 回复此楼
17楼2011-09-02 11:47:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

toughman

新虫 (著名写手)
分离出来的菌
当然要先测16S
其他都是后话
赞一下 回复此楼
18楼2011-09-04 09:18:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

esigui

铁杆木虫 (职业作家)

怕见光
正好需要用  谢谢此贴  受用了
赞一下 回复此楼
很饿很饿总是吃不饱
19楼2011-09-08 08:24:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

nancyyazi

铜虫 (小有名气)
我觉得你既然是分离细菌（我不清楚你要分离的是什么细菌），至少要经过初筛和复筛吧。筛选出来比较好的也就那么几株，你再进行生理生化鉴定和16s RNA，这样工作量就会小很多。
赞一下 回复此楼
20楼2011-09-08 09:04:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 西门炊饼 的主题更新
362/4返回列表上一页1234下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 求调剂 +18 111623 2026-04-04 20/1000 2026-04-06 00:35 by T可可西里T
[考研] 272分求调剂 +4 wangyile2233 2026-04-02 4/200 2026-04-05 22:21 by 286640313
[考研] 377求调剂 +6 by.ovo 2026-04-05 6/300 2026-04-05 22:18 by dongzh2009
[考研] 材料专硕283求调剂 +14 试试看呗 2026-04-04 15/750 2026-04-05 19:21 by jkddd
[考研] 080200学硕，机械工程专业277分，求带走！ +7 瓶子PZ 2026-03-31 7/350 2026-04-05 17:49 by liucky
[考研] 0860 求调剂 一志愿国科大 348 分 +3 WiiiP 2026-04-03 3/150 2026-04-05 17:43 by Ecowxq666！
[考研] 328分调剂 +6 门men 2026-04-04 6/300 2026-04-05 13:40 by imissbao
[考研] 349求调剂 +11 zwjjjjjj 2026-03-31 11/550 2026-04-04 19:52 by 蓝云思雨
[考研] 321求调剂 +6 认真求上学 2026-04-03 6/300 2026-04-04 19:51 by dongzh2009
[考研] 一志愿085404，总分291，四级已过，求调剂 +5 阿俊阿俊阿俊 2026-04-04 7/350 2026-04-04 13:23 by 莲菜就是藕吧
[考研] 387求调剂 +4 爱吃片豆土 2026-04-03 5/250 2026-04-04 08:10 by 岸上的一条鱼
[考研] 本科985，专业0812分336求调剂 +4 莫莫很行 2026-04-03 4/200 2026-04-03 21:31 by zhq0425
[考研] 兽医调剂 +3 wh119216 2026-04-02 3/150 2026-04-03 19:34 by zrongyan
[考研] 301求调剂 +14 A_JiXing 2026-04-01 14/700 2026-04-03 18:31 by ls刘帅
[考研] 279求调剂 +6 qazplm0852 2026-04-02 6/300 2026-04-03 10:03 by 蓝云思雨
[考研] 一志愿a区211，085601-307分求调剂 +13 党嘉豪 2026-03-31 26/1300 2026-04-03 08:33 by 495374996
[考研] 一志愿大工学硕，求调剂 +4 yub0811 2026-04-02 4/200 2026-04-02 21:36 by 百灵童888
[考研] 材料调剂 +11 一样YWY 2026-03-31 11/550 2026-04-01 22:25 by zhouyuwinner
[考研] 求调剂，一志愿北林食品与营养095500，301分，已过六级，有科研经历 +4 快乐储蓄罐 2026-03-31 4/200 2026-04-01 09:26 by JourneyLucky
[考研] 材料专硕 085600求调剂 +7 BBQ233 2026-03-30 7/350 2026-03-30 17:44 by oooqiao
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭