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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 关于筛选和鉴定细菌(16S rRNA)
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爱睡猪

金虫 (正式写手)
功能基因设计引物PCR  有的话再分子标记获得基因 测序
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ControlMyself
31楼2013-05-26 16:44:33
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破网

至尊木虫 (著名写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 粉靛蓝 at 2011-08-29 16:47:30
那你要测很多菌了？ 那费用会很高的 测一个是一千多

测序很便宜。。。几十块钱!！你别吓唬人。

就算自己不处理，拿纯样品公司做，也就几百块钱。
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go
32楼2013-05-26 21:46:07
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金洁南

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
16楼: Originally posted by abduwaly at 2011-09-02 01:47:15
你好，微生物分离鉴定可分为可培养微生物鉴定和不可培养微生物鉴定。可培养法是需要必须经过细心培养和纯化。而不可培养法不需要分离，只是把总DNA提取进行PAGE电泳即可得到样品中的细菌类型。但不能获得菌落的信息 ...

想问一下楼主，为什么不能用LB呢？
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33楼2014-01-19 09:44:28
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lmxlxj

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
16楼: Originally posted by abduwaly at 2011-09-02 01:47:15
你好，微生物分离鉴定可分为可培养微生物鉴定和不可培养微生物鉴定。可培养法是需要必须经过细心培养和纯化。而不可培养法不需要分离，只是把总DNA提取进行PAGE电泳即可得到样品中的细菌类型。但不能获得菌落的信息 ...

不明白为什么不要用LB和TSA培养基？？？
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34楼2014-09-01 20:13:12
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m2hy

金虫 (正式写手)
个人建议楼主是需要进行初筛和复筛的，根据目的菌群选择最佳的选择性培养基，初筛后根据经验及资料通过菌株形态，菌落结构，色泽等选择目标性菌株，在进行复筛并纯化后进行分子生物学鉴定。
以前组里有人采用你说的方法并结合DGGE,但是，虽然最后确定了混合样中有很多新的菌株，但是，分离纯化非常困难，最后也没能较好的分出纯菌。
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人生能有几回搏？此时不搏待何夕？
35楼2014-09-02 23:56:04
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月~朦胧

新虫 (初入文坛)
请问你的菌株分离的怎么样了？我也是做这一块的。我是从污水厂的污泥里分出1~3株具有好养反硝化能力的脱氮菌株，我的做法是：先对污泥里的细菌进行了富集培养24h，稀释后在进行平板划线，对生长比较好的菌落进行挑菌，进入选择培养基（本人加的是硝态氮为氮源）选择培养，同时进行总氮的检测，对去除率好的菌落重复上述步骤，直到氮的去除率达到稳定后我进行了提DNA测序，并通过PCR-DGGE琼脂糖凝胶电泳实验跑胶来确定样品菌种是否为纯种。目前我遇到的问题是：初步可以确定我分离的菌株的类型但是敢肯定，另外就是样品菌株不太纯，需要进一步纯化但是找不到很好的办法。
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36楼2014-10-11 10:02:08
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