应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 考马斯亮蓝法测蛋白含量时吸光度A595nm为负值！！！求助
51/1返回列表
查看: 5681  |  回复: 11
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
本帖产生 3 个 BioEPI ，点击这里进行查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

huazi5853

银虫 (初入文坛)

[求助] 考马斯亮蓝法测蛋白含量时吸光度A595nm为负值！！！求助

小弟用内含4mol/L NaCl 的0.05M Tris-HCl 缓冲液去除猪皮中的非胶原蛋白，4℃条件下处理24h，取滤液，用考马斯亮蓝法测滤液中蛋白含量，以蒸馏水为空白样，测A595nm，结果发现待测液波长是负值，很迷惑，求大侠指点，谢谢！！
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

我的实验

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

红袖sweet

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
十年修得同船渡
1楼 2011-08-26 16:17:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

huazi5853

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by dannyboy at 2011-08-28 08:58:44:
空白应该用你所用的缓冲液才不会出现负值！

可是 在这之前 标准曲线所用的空白样 是用蒸馏水做的。  
如果以缓冲液作空白去测定吸光度，并将吸光度值代入标准曲线求其蛋白浓度。前后空白样不一样 这样可以吗
赞一下 回复此楼
十年修得同船渡
8楼2011-08-28 10:09:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 12 个回答

xilababy

木虫 (小有名气)

圣斗士

【答案】应助回帖

★ ★ ★
huazi5853(金币+6): 非常感谢：） 2011-08-27 10:08:17
lstt09nk(金币+3): 鼓励参与 2011-08-27 10:37:14
silicare(BioEPI+1): 2011-11-07 14:51:45
为什么不用你的Tris溶液做空白呢   Tris会影响考马斯亮蓝的测试结果的  但影响不大  我之前也碰到这种情况  一开始是因为考马斯亮蓝放太久了，染色能力不行了，所以微量的蛋白浓度时检测不到的，ABS也为负，后来换了考马斯亮蓝结果好了很多，只要蛋白浓度不低于0.01mg/ml 就不会为负值
赞一下(2人) 回复此楼
加油文章毕业偶也
2楼2011-08-27 09:04:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xilababy

木虫 (小有名气)

圣斗士
我是用Tris作空白
赞一下 回复此楼
加油文章毕业偶也
3楼2011-08-27 09:05:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

protein_

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
lstt09nk(金币+2): 感谢交流 2011-08-27 10:37:25
huazi5853(金币+4): 嗯 好 谢谢你：） 2011-08-28 10:05:41
silicare(BioEPI+1): 2011-11-07 14:52:05
你用你的考马斯亮蓝原液做空白试试，  除非你的蛋白里面没有疏水基团，毕竟考马斯亮蓝测蛋白局限性很大，真不行就定氮
赞一下(2人) 回复此楼
4楼2011-08-27 10:20:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 12 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭