应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 切胶纯化
141/2返回列表12下一页
查看: 1654  |  回复: 13
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

madengyu

禁虫 (小有名气)
本帖内容被屏蔽

» 猜你喜欢
1楼 2011-08-15 09:27:45
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

madengyu

禁虫 (小有名气)
本帖内容被屏蔽
2楼2011-08-15 09:29:08
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

w2boluo

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
1949stone(金币+3): 是滴 2011-08-15 11:19:04
madengyu(金币+2): 2011-08-15 12:06:37
高保真酶的反应做到特异性这么好已经难能可贵了。任何时候只要电泳看的见都应该可以连上。可以不必浓缩直接做下一步的。
说明书有的时候害人，不必每一步都切胶纯化的，切一次胶达到上述图片效果就行了，除去加A用的taq酶和dATP之类用pcr产物纯化试剂盒就可以了。
赞一下(1人) 回复此楼
How about the future？
3楼2011-08-15 09:43:12
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

friya0910

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
西瓜(金币+2): 鼓励！ 2011-08-15 13:24:28
引用回帖:
1楼: Originally posted by madengyu at 2011-08-15 09:27:45:
大家好！麻烦大家帮我解决一下问题。
      我PCR用的是高保真酶，不能直接克隆T载体，又进行了加A反应。加A说明书上要求，PCR产物先切胶纯化。所以我在加A之前跑了PCR产物的电泳（见电泳图片），进行了切胶纯化 ...

我觉得你这切胶回收的效果做TA克隆应该是没问题的！祝好运！
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2011-08-15 09:51:24
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

blackrose8089

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
西瓜(金币+1): 感谢回帖交流 2011-08-15 13:24:38
楼主为何不用Blunt载体转化呢？
赞一下(1人) 回复此楼
jiayoubashaonian
5楼2011-08-15 10:12:55
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

roomofxw

木虫 (正式写手)
★ ★
西瓜(金币+2): 鼓励交流 2011-08-15 13:07:13
一般不需要
直接连接，转化就可以。想想你能看见的时候，得有多少分子啊，每个分子理论上能转化一个菌，而你最少只需要一个正确的克隆就可以进行试验了啊
赞一下(1人) 回复此楼
6楼2011-08-15 12:58:35
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gwbk

木虫 (正式写手)
★
西瓜(金币+1): 实际经验很重要 2011-08-16 11:51:32
不管电泳跑的好不好，先往下做试试，理论和实际有差距的，甚至相反。
赞一下(1人) 回复此楼
7楼2011-08-15 23:26:13
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

瓶儿花

金虫 (小有名气)
★ ★
dhd997(金币+2): 鼓励交流 2011-08-30 18:43:07
可以做TA克隆了，用PCR产物纯化试剂盒纯化也OK的，T载体连接的效率很高的。
赞一下(1人) 回复此楼
8楼2011-08-30 14:12:12
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lingxingcao

新虫 (小有名气)
楼主，请问你的上样量是多少ul啊？
赞一下 回复此楼
9楼2011-08-30 16:42:48
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

未知树

木虫 (著名写手)
这个效果挺好的了， 直接做连接吧。 T载体都很OK的
祝好运~
赞一下 回复此楼
每一天都是一个新的起点
10楼2011-08-30 22:07:37
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 madengyu 的主题更新
141/2返回列表12下一页
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 投票:  有多少人是今天查系统知道结果的？ +16 爱看书的可乐 2026-08-26 18/900 2026-08-28 17:09 by winsaint
[基金申请] 为什么资助数各大高校都创新高，自己申请怎么就这么难 +11 Kittylucky 2026-08-27 12/600 2026-08-28 16:26 by lyxiaomc
[基金申请] 有没有仍没收到信息的 +3 德尚中行 2026-08-27 3/150 2026-08-28 15:24 by rongshuxia
[教师之家] 导师吐槽：我怎么摊上了这么个极品研究生！ +8 苏东坡二世 2026-08-23 8/400 2026-08-28 14:41 by lkforward
[基金申请] 2026年叶企孙基金 +3 bud_bud 2026-08-27 6/300 2026-08-28 11:53 by bud_bud
[基金申请] 基金系统什么内容也没有 30+4 winsaint 2026-08-27 9/450 2026-08-28 11:06 by maolC
[基金申请] 怎么查啊 +6 huang1991js 2026-08-26 6/300 2026-08-28 08:42 by winsaint
[基金申请] 哪位高人中了，把查询到的截图贴出来让我看看，让我长长见识 +5 yuleib84 2026-08-26 6/300 2026-08-28 00:02 by yudaoqian88
[基金申请] 申请删除本帖 +6 lyz123lyz 2026-08-27 7/350 2026-08-27 17:31 by 宁静致远sy
[基金申请] 看板上这么多中的，有点像50人群里49个人都是骗子的那种感觉…… +5 a089 2026-08-26 6/300 2026-08-27 14:05 by jonewore
[基金申请] 怎么看青基中了没有啊 +5 叶九微 2026-08-26 5/250 2026-08-27 10:35 by l_zh2008
[基金申请] 为什么 国际(地区)合作与交流项目 没有放榜？ 10+3 majunge000 2026-08-26 11/550 2026-08-27 08:42 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 2026年的国家社科基金项目通讯评审的新规则与新动向、新挑战 +7 process2012 2026-08-23 10/500 2026-08-26 19:23 by hmhminy
[基金申请] 范进中举一文的中心思想 +9 炎黄贵胄 2026-08-22 10/500 2026-08-26 15:40 by semaglutide
[基金申请] 2026年8月25日国自然放榜前突然收到列入评审专家邮件，有关系吗？ +25 木水思豆 2026-08-25 28/1400 2026-08-26 14:53 by draco1987
[基金申请] 国际合作可查了，中了面上 (EPI+1)(金币+50) +18 Ldrop2023 2026-08-26 18/900 2026-08-26 11:15 by cmrandy
[基金申请] 国合现在查不到了吗？ +10 chengyan1220 2026-08-24 20/1000 2026-08-26 08:57 by peasantsprig
[基金申请] 牛来！米来！面来！ +8 beefly 2026-08-26 8/400 2026-08-26 08:37 by xuzhipiao
[基金申请] 在坚冰还盖着北海的时候，我看到了怒放的梅花。 (金币+10) +6 ziyangfang 2026-08-25 9/450 2026-08-25 20:26 by huagongfeihu
[基金申请] 明天应该可查了！？ +6 chengyan1220 2026-08-23 6/300 2026-08-25 19:45 by zfd97
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭