应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 切胶纯化
141/2返回列表12下一页
查看: 1565  |  回复: 13
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

madengyu

禁虫 (小有名气)
本帖内容被屏蔽

» 猜你喜欢
1楼 2011-08-15 09:27:45
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

madengyu

禁虫 (小有名气)
本帖内容被屏蔽
2楼2011-08-15 09:29:08
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

w2boluo

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
1949stone(金币+3): 是滴 2011-08-15 11:19:04
madengyu(金币+2): 2011-08-15 12:06:37
高保真酶的反应做到特异性这么好已经难能可贵了。任何时候只要电泳看的见都应该可以连上。可以不必浓缩直接做下一步的。
说明书有的时候害人，不必每一步都切胶纯化的，切一次胶达到上述图片效果就行了，除去加A用的taq酶和dATP之类用pcr产物纯化试剂盒就可以了。
赞一下(1人) 回复此楼
How about the future？
3楼2011-08-15 09:43:12
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

friya0910

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
西瓜(金币+2): 鼓励！ 2011-08-15 13:24:28
引用回帖:
1楼: Originally posted by madengyu at 2011-08-15 09:27:45:
大家好！麻烦大家帮我解决一下问题。
      我PCR用的是高保真酶，不能直接克隆T载体，又进行了加A反应。加A说明书上要求，PCR产物先切胶纯化。所以我在加A之前跑了PCR产物的电泳（见电泳图片），进行了切胶纯化 ...

我觉得你这切胶回收的效果做TA克隆应该是没问题的！祝好运！
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2011-08-15 09:51:24
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

blackrose8089

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
西瓜(金币+1): 感谢回帖交流 2011-08-15 13:24:38
楼主为何不用Blunt载体转化呢？
赞一下(1人) 回复此楼
jiayoubashaonian
5楼2011-08-15 10:12:55
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

roomofxw

木虫 (正式写手)
★ ★
西瓜(金币+2): 鼓励交流 2011-08-15 13:07:13
一般不需要
直接连接，转化就可以。想想你能看见的时候，得有多少分子啊，每个分子理论上能转化一个菌，而你最少只需要一个正确的克隆就可以进行试验了啊
赞一下(1人) 回复此楼
6楼2011-08-15 12:58:35
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gwbk

木虫 (正式写手)
★
西瓜(金币+1): 实际经验很重要 2011-08-16 11:51:32
不管电泳跑的好不好，先往下做试试，理论和实际有差距的，甚至相反。
赞一下(1人) 回复此楼
7楼2011-08-15 23:26:13
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

瓶儿花

金虫 (小有名气)
★ ★
dhd997(金币+2): 鼓励交流 2011-08-30 18:43:07
可以做TA克隆了，用PCR产物纯化试剂盒纯化也OK的，T载体连接的效率很高的。
赞一下(1人) 回复此楼
8楼2011-08-30 14:12:12
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lingxingcao

新虫 (小有名气)
楼主，请问你的上样量是多少ul啊？
赞一下 回复此楼
9楼2011-08-30 16:42:48
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

未知树

木虫 (著名写手)
这个效果挺好的了， 直接做连接吧。 T载体都很OK的
祝好运~
赞一下 回复此楼
每一天都是一个新的起点
10楼2011-08-30 22:07:37
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 madengyu 的主题更新
141/2返回列表12下一页
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 化学专业申博 +3 赵子羊 2026-05-23 4/200 2026-05-24 18:10 by 工大学长
[基金申请] 评审有感 +16 popular289 2026-05-18 27/1350 2026-05-24 17:34 by hhs666
[教师之家] 论文撤稿了 +4 bjvtcliu 2026-05-24 7/350 2026-05-24 17:29 by bjvtcliu
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 hvkbtfonbv 2026-05-23 4/200 2026-05-24 17:21 by 75ui6h7z2t
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 hvkbtfonbv 2026-05-23 3/150 2026-05-24 17:10 by 75ui6h7z2t
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 hvkbtfonbv 2026-05-23 3/150 2026-05-24 17:01 by 75ui6h7z2t
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 a2tycdlnq1 2026-05-23 5/250 2026-05-24 16:21 by hhx1yx9evi
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 a2tycdlnq1 2026-05-23 4/200 2026-05-24 16:16 by hhx1yx9evi
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 pmo95bazuy 2026-05-23 8/400 2026-05-24 15:56 by 1uy1ht2y9r
[教师之家] 某211大学教师把个人教师官方主页改成:我跑了我跑了我跑了!官宣跑路！ +4 zju2000 2026-05-21 5/250 2026-05-24 09:35 by songwz
[考博] 26/27申博自荐 10+4 ZXW0202 2026-05-22 9/450 2026-05-24 08:47 by bjvtcliu
[考博] 博士申请 +3 焦晓明 2026-05-21 3/150 2026-05-23 11:26 by mlc840311
[论文投稿] 投稿求助，期刊 +4 希冀，有书读 2026-05-20 8/400 2026-05-22 10:16 by 希冀，有书读
[文学芳草园] 献血感触 +7 呀呀好傻 2026-05-19 13/650 2026-05-21 20:15 by 呀呀好傻
[基金申请] 国自然评分 +4 无名者登山 2026-05-20 5/250 2026-05-21 16:35 by swuq
[基金申请] 国自然上会要求 +7 无名者登山 2026-05-18 11/550 2026-05-21 15:50 by draco1987
[基金申请] 提交了我也来说说感想 +9 fummck 2026-05-20 10/500 2026-05-21 14:17 by draco1987
[有机交流] 反应很差，大量原料没有反应 5+3 Mr.Zot 2026-05-19 8/400 2026-05-20 22:19 by Equinoxhua
[考博] 如果工作了想读博，可以边工作边读全日制嘛？ 30+3 铁达火车 2026-05-18 5/250 2026-05-20 09:33 by tfang
[考博] 博士申请 +5 星…… 2026-05-18 6/300 2026-05-18 23:49 by 糊糊涂涂好
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭