8楼: Originally posted by coreopsisy at 2012-06-26 14:54:45
为什么说不是问题，1598975说的问题确实存在，若要敲除质粒中的上的一个基因，若质粒是多拷贝，部分质粒上基因能被敲除，部分仍含有此段基因的质粒仍能存在，敲除工作不能成功，，...

2楼: Originally posted by yguang at 2011-08-13 00:33:30:
本质上没区别，质粒上应该选择更多一些，比如要敲除的基因内部如果有相同酶切位点的，直接用这个酶切后连接即得到此基因部分缺失的突变，在质粒上也很方便做点突变，好多试剂盒都可以做好几个点的突变！

3楼: Originally posted by william9798 at 2011-08-13 00:41:59:
我是通过同源重组的方法构建打靶载体，然后二亲接合，倒入受体菌中，与受体菌株的野生型质粒上的目的基因发生双交换，达到使该基因失活的目的。