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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » SDS-page　分离胶不凝固
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twisty

木虫 (正式写手)

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[求助] SDS-page　分离胶不凝固

12.5%分离胶配制为：Ａ：4.17mL
                                  B:   2.5mL
                                 H2O:3.3mL
                                AP:50微升
　　　　　　　　　TEMED:10微升
按比例加入电泳槽后，只有近50%凝固了，这是为什么？
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1楼2011-08-11 09:10:35
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yuandian114

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
lstt09nk(金币+3): 鼓励交流，欢迎常来 2011-08-11 13:23:26
twisty(金币+2): 过硫酸铵我配好后一直放在四度冰箱里了，也许是它的原因，真是感谢你了！ 2011-08-11 14:23:32
1.可适当增加过硫酸铵和TEMED的用量
2.我配12.5%的胶是A：7.5ml   B：4.5 ml   水：6ml。过硫酸铵40ul  TEMED 10ul（我通常会多加，如过硫酸铵加80ul，TEMED加15ul）             配一面胶用量减半。
3.过硫酸铵要现配现用，lz是不是之前配的呢
4.冬天温度低时，我会放在37度培养箱里，凝得比较快。
祝顺利
赞一下(2人) 回复此楼
5楼2011-08-11 11:17:47
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yuandian114

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

引用回帖:
5楼: Originally posted by yuandian114 at 2011-08-11 11:17:47:
1.可适当增加过硫酸铵和TEMED的用量
2.我配12.5%的胶是A：7.5ml   B：4.5 ml   水：6ml。过硫酸铵40ul  TEMED 10ul（我通常会多加，如过硫酸铵加80ul，TEMED加15ul）             配一面胶用量减半。
3.过硫酸铵 ...

这样啊，谢谢哦，在保证过硫酸铵没出现问题的情况下这样会方便些，小女都是根据师兄师姐的经验现配现用的，一般0.1g加200ul的蒸馏水，虽然麻烦点但一般可排除过硫酸的问题。谢谢大侠哈，偶长见识了。
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7楼2011-08-11 12:00:34
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