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gwbk

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
dhd997(金币+5, MolEPI+1): good 2011-08-05 08:09:54
zgb1982(金币+1): 2011-08-05 14:46:41
都需要计算在内的
1,第一、二次扩增(循环),退火温度按互补碱基数计算(一般不包括酶切位点和保护碱基序列)。
2,第三次扩增分两种情况,以原始模板、第一次扩增的序列、第二次以原始模板扩增的序列,与第一步退火温度计算相同;以第二次扩增出来的序列(带有两端引物和保护碱基的全基因序列)为模板,此时引物与模板完全互补,退火温度按引物全部序列计算。
3,合成中后期,两端全部与引物互补的DNA片段占有绝对优势。

应该按照全部序列计算退火温度。
5楼2011-08-05 00:11:18
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