24小时热门版块排行榜    

查看: 7859  |  回复: 7

mfkwgeg

新虫 (初入文坛)

[求助] 实时定量PCR,一定要做标准曲线么?有什么作用?

我是个实验新手,想问一下做实时定量PCR时,一定要做标准曲线么?一般做多大的体系呢?

[ Last edited by mfkwgeg on 2011-7-31 at 09:50 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

love_st

金虫 (著名写手)


【答案】应助回帖


1949stone(金币+1): 鼓励 2011-07-31 20:47:51
想定量就做标准曲线,仅定性就不用,体系大小无所谓,看个人,一般有20、25、40、50ul
2楼2011-07-31 19:40:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

blackrose8089

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

1949stone: 欢迎多多交流 2011-07-31 20:48:12
mfkwgeg(金币+1): 2011-07-31 22:59:01
楼主做相对定量吗?
jiayoubashaonian
3楼2011-07-31 19:46:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

daizi368

铜虫 (小有名气)

楼主做的是普通RT—PCR?QRT-PCR根本不用标准曲线吧。RT-PCR后琼脂糖电泳半定量分析,如果差别小的话很难看出区别的,建议上一个QRT
4楼2011-08-01 09:09:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mfkwgeg

新虫 (初入文坛)

我是做相对定量,就是想看一下样品处理后不同时间段相关基因的表达量
5楼2011-08-01 10:41:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shuanyu0202

木虫 (小有名气)

★ ★
西瓜(金币+2): Good 2011-08-01 17:07:15
相对定量不需要做标准曲线的,标准曲线是用来做绝对定量的。我最近也在做QPCR,因为是相对定量,所以都没有做标曲。
6楼2011-08-01 15:04:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

我和我自己

铁虫 (小有名气)

★ ★
西瓜(金币+2): 鼓励交流。标准曲线可以用来计算扩增效率,严谨的做法是每个基因起码测一次扩增效率,不过很多人都做相对定量都省这一步,包括偶…… 2011-08-01 17:09:26
如果只是做相对定量的,荧光定量PCR需要标准曲线进行校准,用control RNA做校准,不过一般不用你自己做,管仪器的老师会调整的
7楼2011-08-01 16:03:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lixiaojing1318

银虫 (小有名气)


做相对定量开始的时候也是需要做下标准曲线的,大体看下是那个浓度合适
8楼2011-08-11 11:41:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 mfkwgeg 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[论文投稿] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +4 2JOx3r2CYEgw 2026-08-21 9/450 2026-08-23 18:46 by lXgU0RvNTDC9
[论文投稿] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 DpSrDtM079iu 2026-08-22 3/150 2026-08-23 15:33 by KM5EcsNQRBPn
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 DpSrDtM079iu 2026-08-22 4/200 2026-08-23 15:30 by KM5EcsNQRBPn
[考博] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-22 4/200 2026-08-23 14:57 by KM5EcsNQRBPn
[公派出国] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-21 6/300 2026-08-23 14:45 by KM5EcsNQRBPn
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-21 5/250 2026-08-23 14:33 by KM5EcsNQRBPn
[基金申请] 2026年的国家社科基金项目通讯评审的新规则与新动向、新挑战 +3 process2012 2026-08-23 4/200 2026-08-23 12:54 by huixian257
[考博] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 h4CP7TrQR8Lg 2026-08-22 5/250 2026-08-23 12:09 by LR9qGULyN2ew
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-21 9/450 2026-08-23 10:44 by IXZuIJ2Q7OVy
[基金申请] 今天放榜吗? +15 布布和一二 2026-08-19 16/800 2026-08-23 09:55 by 张春生
[考博] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 DpSrDtM079iu 2026-08-22 3/150 2026-08-23 00:55 by OEbVnUOu01ol
[基金申请] 93BebMhtakh前后11位开头都是大写 +7 且听虎啸 2026-08-17 8/400 2026-08-22 21:55 by 医学老男孩
[基金申请] filecode,4个jtjc了 +13 ziyangfang 2026-08-19 16/800 2026-08-22 17:08 by WH3796
[教师之家] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 2JOx3r2CYEgw 2026-08-21 4/200 2026-08-22 16:52 by sunzitan
[基金申请] 今天基金会出结果吗?20260819 +16 kkkl_v 2026-08-19 17/850 2026-08-22 16:12 by 阿布Abu
[基金申请] 放榜前的不淡定 40+4 snowwithsea 2026-08-19 14/700 2026-08-21 23:51 by cratir
[基金申请] 我面上完蛋了 +7 且听虎啸 2026-08-20 8/400 2026-08-21 12:31 by 酷酷墨镜
[论文投稿] 投稿咨询 +5 wwm09 2026-08-17 7/350 2026-08-21 10:11 by 期刊论文帮手
[基金申请] 基金啊基金 +4 longfie172 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:58 by mark mao
[基金申请] 今天系统多次维护,明天很可能放榜! +10 zju2000 2026-08-16 11/550 2026-08-20 20:02 by cl479861084
信息提示
请填处理意见