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ghaut

金虫 (初入文坛)

[求助] 血浆前处理回收率低怎么办?

最近刚开始做药动,做的是中药复方中的几个成分,现在面临一个很棘手的问题,回收率低。我用空白血浆加对照品这样做回收率,试过各种方法,包括液液萃取、固相萃取、甲醇沉淀蛋白,回收率最高的也就50%(PS:文献上回收率都很高的,90%以上,不知是不是我的操作有问题?)。由于灌胃的是复方,含量本来就比较低,吸收入血的含量就更低,我每个点取1mL全血,到后面几个点几乎就测不出来了,所以我还是觉得回收率是个大问题,请教各位这种情况怎么办?
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ghaut

金虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by tingzai0116 at 2011-07-26 09:19:39:
你做的甲醇沉淀蛋白后没有吹干复溶吗? 吹干后再用小体积甲醇复溶试试吧……!

吹干以后200uL甲醇复溶的。感觉溶解的不完全,做出来结果也不高。
8楼2011-08-06 12:04:30
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snowmail2000

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


中药2000(金币+1): 谢谢。 2011-07-24 14:38:28
回收率主要是从药物的性质入手考虑。沉淀蛋白等方法都是适用于极性比较大的药物,并且甲醇的体积也应该是血浆体积的2-3倍,否则难以完全破坏掉血浆中的蛋白质‘如果药物的极性比较低应该考虑萃取法
沈阳药科大学药学院
2楼2011-07-24 13:13:13
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ghaut

金虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by snowmail2000 at 2011-07-24 13:13:13:
回收率主要是从药物的性质入手考虑。沉淀蛋白等方法都是适用于极性比较大的药物,并且甲醇的体积也应该是血浆体积的2-3倍,否则难以完全破坏掉血浆中的蛋白质‘如果药物的极性比较低应该考虑萃取法

阿魏酸应该属于极性偏大的成分呀,溶于甲醇,微溶于水。3倍量甲醇沉淀,回收率比乙酸乙酯萃取还低...
3楼2011-07-24 13:23:54
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hulina03

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


qinhy(金币+1): 多谢应助回帖~ 2011-08-07 20:36:41
你做的是提取回收率实验,提取回收率基本都比较低,但要求大于70%才能合格,你再试试用已经提取看看,多提去几次,合并提取液。
4楼2011-07-25 10:51:25
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