应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 求助DNA提取方法
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
21/1返回列表
查看: 1813  |  回复: 10
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
本帖产生 2 个 MolEPI ，点击这里进行查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
dhd997(金币+5, EPI+1): good 2011-07-05 19:17:12
1949stone:编辑内容 2011-07-05 19:42
1949stone:编辑内容 2011-07-05 19:43
追梦的人1987(金币+1): 2011-07-05 22:20:20
2.10.1.1染色体总DNA少量提取
（1） 取过夜培养菌液1.5ml于2.0ml EP管中，9000rpm离心2min，弃上清，收集菌体，吸干水分；
（2） 对G+菌株加100g/ml溶菌酶50l，30℃处理1h；
（3） 裂解：向每管加200l裂解缓冲液（40mmol/L Tris-HCl，20mmol/L 乙酸钠，1mol/L EDTA，1% SDS，pH8.0），迅速剧烈抽吸悬浮菌体，使其裂解；
（4） 加入66l 5mol/L NaCl，充分混匀，12000rpm离心10min，沉淀蛋白及细胞壁；
（5） 收集上清液，用等体积苯酚/氯仿抽提，12000rpm离心10min
（6） 收集上清液，加入与上清液等体积的氯仿:异戊醇（24:1），混匀，12000 rpm离心10 min；
（7） 取上清液加入2倍体积无水乙醇，温和颠倒，13000 rpm离心15 min；
（8） 弃上清，沉淀物用1ml 75%的乙醇冲洗2-3次，真空干燥器干燥总DNA沉淀；
（9） 基因组DNA沉淀用30 μl TE 或ddH2O溶解。并进行琼脂糖核酸电泳，检验大小及浓度，-20℃储存。

[ Last edited by 1949stone on 2011-7-5 at 19:43 ]
赞一下(1人) 回复此楼
流星来时我许了个愿，愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具，久不看论坛一来就提问者，宁弃EPI和VIP也不回帖。
2楼2011-07-05 19:03:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

智能机器人

Robot (super robot)

我们都爱小木虫

找到一些相关的精华帖子，希望有用哦~

科研从小木虫开始，人人为我，我为人人

冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
dhd997(金币+5, EPI+1): 2011-07-06 07:42:38
发上来的时候有的出现了乱码，重发一次，有些单位用汉字打

2.10.1.1染色体总DNA少量提取
（1） 取过夜培养菌液1.5毫升于2.0毫升EP管中，9000rpm离心2min，弃上清，收集菌体，吸干水分；
（2） 对G+菌株加100微克/毫升溶菌酶50微升，30℃处理1h；
（3） 裂解：向每管加200微升裂解缓冲液（40毫摩尔/升 Tris-HCl，毫摩尔/升乙酸钠，1摩尔/升 EDTA，1% SDS，pH8.0），迅速剧烈抽吸悬浮菌体，使其裂解；
（4） 加入66微升5摩尔/升NaCl，充分混匀，12000rpm离心10min，沉淀蛋白及细胞壁；
（5） 收集上清液，用等体积苯酚抽提，12000rpm离心10min；（也可尝试用苯酚/氯仿）
（6） 收集上清液，加入与上清液等体积的氯仿:异戊醇（24:1），混匀，12000 rpm离心10 min；
（7） 取上清液加入2倍体积无水乙醇，温和颠倒，13000 rpm离心15 min；
（8） 弃上清，沉淀物用1毫升75%的乙醇冲洗2-3次，真空干燥器干燥总DNA沉淀；
（9） 基因组DNA沉淀用30微升TE 或ddH2O溶解。并进行琼脂糖核酸电泳，检验大小及浓度，-20℃储存。

要是你不知道是不是G+，那还是加吧。
赞一下(1人) 回复此楼
流星来时我许了个愿，愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具，久不看论坛一来就提问者，宁弃EPI和VIP也不回帖。
7楼2011-07-06 00:22:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 追梦的人1987 的主题更新
21/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 081200-11408-276学硕求调剂 +3 崔wj 2026-03-31 3/150 2026-03-31 11:32 by 求调剂zz
[考研] 求调剂 +5 11ggg 2026-03-30 5/250 2026-03-31 10:46 by Jaylen.
[论文投稿] chinese chemical letters英文版投稿求助 130+3 Yishengeryi 2026-03-30 3/150 2026-03-31 10:10 by 北京莱茵润色
[考研] 吉大生物学326分求调剂 +3 sunnyupup 2026-03-31 3/150 2026-03-31 09:28 by longlotian
[考研] 材料求调剂 一志愿哈工大总分298分，前三科223分 +10 dongfang59 2026-03-27 10/500 2026-03-30 23:42 by 果果妈咪
[考研] 277跪求调剂 +8 1915668 2026-03-27 12/600 2026-03-30 21:01 by dophin1985
[考研] 11408总分309，一志愿东南大学求调剂，不挑专业 +5 天赋带到THU 2026-03-29 6/300 2026-03-30 20:49 by dick_runner
[考研] 生物学 296 求调剂 +5 朵朵- 2026-03-26 7/350 2026-03-30 20:07 by 源_2020
[考研] 一志愿南开大学0710生物学359求调剂 +5 兔兔兔111223314 2026-03-29 7/350 2026-03-30 18:29 by 兔兔兔111223314
[考研] 317分 一志愿南理工材料工程 本科湖工大 求调剂 +12 芋泥小铃铛 2026-03-28 12/600 2026-03-30 17:06 by wangjy2002
[考研] 329求调剂 +8 星野? 2026-03-26 8/400 2026-03-30 13:41 by chemdavid
[考研] 一志愿南航 335分 | 0856 | GPA 4.07 | 有科研经历 +8 cccchenso 2026-03-29 8/400 2026-03-29 23:53 by 我是小康
[考研] 085600，材料与化工321分求调剂 +10 大馋小子 2026-03-28 10/500 2026-03-29 23:35 by 飞行日记西
[考研] 329求调剂 +10 钮恩雪 2026-03-25 10/500 2026-03-29 13:32 by peike
[考研] 一志愿北京理工大学本科211材料工程294求调剂 +8 mikasa的围巾 2026-03-28 8/400 2026-03-29 12:48 by 无际的草原
[考研] 本科双非材料，跨考一志愿华电085801电气，283求调剂，任何专业都可以 +6 芝士雪baoo 2026-03-28 8/400 2026-03-29 08:16 by 松花缸1201
[考研] 304求调剂 +6 曼殊2266 2026-03-27 6/300 2026-03-28 14:10 by 唐沐儿
[考研] 一志愿吉大071010，316分求调剂 +3 xgbiknn 2026-03-27 3/150 2026-03-27 10:36 by guoweigw
[考研] 材料与化工304求B区调剂 +3 邱gl 2026-03-25 3/150 2026-03-25 19:03 by Ainin_
[考研] 一志愿吉林大学材料与化工303分求调剂 +4 为学666 2026-03-24 4/200 2026-03-25 11:27 by BruceLiu320
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭