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tmhua

铁虫 (小有名气)

[求助] 无孢子真菌的保存方法

本人最近分离到一些无孢子真菌,需要保存。但不知道哪种保存方法较为合适。以前用甘油保存,结果半年后发现有些转出来活化不出来了。
求有做这方面的大虾能帮帮我。
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

促孢培养基的配方是
KH2PO4 1 g , KNO3 1 g ,MgSO4·7H2O 0.5 g ,KCl 0.5 g ,淀粉 0.2 g ,葡萄糖 0.2 g ,蔗糖 0.2 g ,琼脂 15 g ,水1 000 mL。
http://www.zlunwen.com/pharmacological/clinicalmedicine/61833.htm

碳源和氮源都很少,有机物和无机物也很少,渗透压很小,长不好的,产孢效果值得怀疑。碳源淀粉葡萄糖蔗糖加起来才0.06%,远小于我用的2%,要是我是真菌,我就干脆绝食(这么点吃的还要我产仔,我又不能光能自养)。开玩笑而已,不过既然这个培养基不能促进产孢,那还可以换用别的培养基,我曾经摸索过一个真菌产孢子的培养基,一共试了PDA、PY、PY+TB、PY+麦麸、PDA+麦麸、麦麸,结果是菌丝发达程度从大到小为麦麸、PY+麦麸、PDA+麦麸、PDA、PY、PY+TB,但是产孢子能力从大到小为PY+麦麸、PY、PY+TB、麦麸、PDA+麦麸、PDA,我希望菌丝不要太发达,孢子多就行,所以效果由好到坏排序为PY、PY+TB、PY+麦麸、麦麸、PDA+麦麸、PDA。所以如果是不产孢子,可以先换几种培养基,有可能就产了,促孢培养基不一定好,不一定说促孢就真能促孢,微生物很神奇的,不一定以为适合就真能适合。
流星来时我许了个愿,愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具,久不看论坛一来就提问者,宁弃EPI和VIP也不回帖。
9楼2011-07-05 18:07:59
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beautybanana

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
amisking(金币+3): 鼓励应助 2011-07-04 19:47:19
这个要用固体种子培养基保存吧,在试管中加入约5ml的培养基制成斜面培养基,然后将真菌划线(S型划线),培养好后再用封口膜封紧,放在-80度保存,-20度大概也行,不过最好2-3个月再以同样方式接种一次,否则就像你说的一样了活化不出来了~
3楼2011-07-04 16:32:40
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vakeyzhang

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

引用回帖:
Originally posted by beautybanana at 2011-07-04 16:32:40:
这个要用固体种子培养基保存吧,在试管中加入约5ml的培养基制成斜面培养基,然后将真菌划线(S型划线),培养好后再用封口膜封紧,放在-80度保存,-20度大概也行,不过最好2-3个月再以同样方式接种一次,否则就像 ...

你好,我是新虫,我想请问用哪种固体培养基那?PDA?还是~
4楼2011-07-04 17:30:08
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beautybanana

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
amisking(金币+2, EPI+1): 鼓励应助 2011-07-04 19:47:32
引用回帖:
Originally posted by vakeyzhang at 2011-07-04 17:30:08:
你好,我是新虫,我想请问用哪种固体培养基那?PDA?还是~

可以用葡萄糖种子斜面培养基
种子斜面培养基: 葡萄糖 20g 蛋白胨 2.0g 酵母膏 3.0g  硫酸铵 5.0g  琼脂粉 20g pH 自然

5ml左右培养基倒在试管里,倾斜试管做成一个斜面。就是倒好培养基后,试管口用东西垫一下,形成一个倾斜度,等培养基凝固了就可以。
5楼2011-07-04 18:24:15
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