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无孢子真菌的保存方法
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本人最近分离到一些无孢子真菌，需要保存。但不知道哪种保存方法较为合适。以前用甘油保存，结果半年后发现有些转出来活化不出来了。 求有做这方面的大虾能帮帮我。  |
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5楼2011-07-04 18:24:15
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【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★
rainwander(金币+5, EPI+1): 回答的总是那么的详细，赞一个 2011-07-04 22:11:10
tmhua(金币+1): 是啊 孢子抗逆性好，我想弄出孢子来用甘油管或是牛奶管保存，可惜孢子出不来。用促孢培养基都没有出来 2011-07-05 09:49:58
tmhua(金币+4): 2011-08-02 11:04:06
rainwander(金币+5, EPI+1): 回答的总是那么的详细，赞一个 2011-07-04 22:11:10
tmhua(金币+1): 是啊 孢子抗逆性好，我想弄出孢子来用甘油管或是牛奶管保存，可惜孢子出不来。用促孢培养基都没有出来 2011-07-05 09:49:58
tmhua(金币+4): 2011-08-02 11:04:06
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假如将真菌在斜面培养基上接种，等其生长起来之后，整枝试管放进去-80度，那么真菌的生命活动进入休眠，细胞内部的水结晶形成冰晶，在再拿出来到常温下的时候，冰晶复融，这个过程可能会对细胞器造成机械损伤，使真菌细胞生命力下降。所以在低温保存时需要加入甘油或者其它物质做保护剂。 这个回帖令我想起石蜡保存法，就是让真菌生长起来之后加入液体石蜡覆盖菌落，然后常温或者低温保存，我没这样做过，也不知道效果如何，但是这个方法在微生物实验技术之类的书上有相关介绍。 我现在用的是低温保存，用20%甘油作为保护剂，我比楼主幸运，我的菌丝是液体发酵摇瓶里得到的，那时候还没有孢子，而半年后用平板来活化还是长得很好。不知道是不是楼主的甘油浓度出问题，还是某些真菌真的不适合这样保存。 照理说孢子的抗逆性比菌丝强，如果有孢子，保存效果会好一些，我也试过有一株真菌在平板上长好之后放在4度半年之后接种不活的，当时后悔没有早用甘油保存。真菌在不同的培养基上生长状况会不同，换培养基可能会产孢子，就我的经验来说，PDA含有大量葡萄糖，很利于真菌生长，所以菌丝发达孢子稀疏，但如果换了一种培养基，情况可能会不同。我曾经用几种培养基来培养一株真菌，用来获取大量孢子，结果PDA是效果最差的，不知道楼主有没有试过换培养基。 |
6楼2011-07-04 19:55:55