24小时热门版块排行榜    

查看: 7039  |  回复: 14
本帖产生 1 个 MolEPI ,点击这里进行查看
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

清新夏青

新虫 (小有名气)

[求助] 蛋白纯化怎么去除核酸

最近做的蛋白是个核蛋白,结合核酸特别强,试过核酸酶,但效果不太好,请问有没有大侠知道还有什么去除核酸的办法
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

indica

铁虫 (初入文坛)

记得罗氏的一篇专利中提到:加至1.5M的NaCl使核酸与蛋白解离,透析后过肝素柱。当时做的是聚合酶
9楼2013-02-03 16:02:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 15 个回答

zsy1106

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
amisking(金币+3, EPI+1): 鼓励应助 2011-06-30 21:09:30
清新夏青(金币+3): 2011-07-04 13:19:09
1、根据你的蛋白的性质,选择合适的介质和条件,想办法把蛋白结合在柱子上,(有tag的话用这个方法最好了),然后用高盐(0.5-3M NaCl)洗,一般会洗下来一个峰,就是被洗下来的核酸了。
2、试试在高盐条件下加Mn2+,因为高盐可以让核酸和蛋白分离,而Mn2+对核酸沉淀有一定的效果。
但是要十分小心的是,这类蛋白本身的天然性质就是要结合核酸的,有的时候核酸去除干净了,蛋白也沉淀了,所以没那么容易,很多小条件要结合你的蛋白自己去摸索。
2楼2011-06-30 19:10:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zsy1106

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
dhd997(金币+2): good 2011-07-01 01:53:26
清新夏青(金币+1): 2011-07-04 13:19:52
哎,忘记了,肝素柱除核酸的效果也不错的,很多专利中提到的核酸酶的纯化,最后一步都会过一下肝素柱。
3楼2011-06-30 19:12:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xhjggl

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
dhd997(金币+2): good 2011-07-01 01:53:36
提取核酸结合蛋白,可以使用肝素琼脂糖柱  BSP093-1  BSP093-2
4楼2011-06-30 23:27:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 304求调剂 +6 司空. 2026-03-18 6/300 2026-03-18 23:03 by 星空星月
[考研] 一志愿中国海洋大学,生物学,301分,求调剂 +4 1孙悟空 2026-03-17 4/200 2026-03-18 17:59 by fivewind
[考研] 一志愿武理材料305分求调剂 +5 想上岸的鲤鱼 2026-03-18 6/300 2026-03-18 17:53 by 无际的草原
[考研] 295求调剂 +3 一志愿京区211 2026-03-18 5/250 2026-03-18 17:03 by zhaoqian0518
[考研] 085601专硕,总分342求调剂,地区不限 +5 share_joy 2026-03-16 5/250 2026-03-18 14:48 by haxia
[考研] 302求调剂 +10 呼呼呼。。。。 2026-03-17 10/500 2026-03-18 12:45 by Linda Hu
[考研] 0703化学调剂 +3 妮妮ninicgb 2026-03-17 3/150 2026-03-18 10:29 by macy2011
[考研] 268求调剂 +6 简单点0 2026-03-17 6/300 2026-03-18 09:04 by 无际的草原
[考研] 材料与化工求调剂 +6 为学666 2026-03-16 6/300 2026-03-17 20:15 by peike
[考研] 290求调剂 +6 孔志浩 2026-03-12 11/550 2026-03-17 14:41 by 周舟舟77
[考研] 材料工程专硕274一志愿211求调剂 +6 薛云鹏 2026-03-15 6/300 2026-03-17 11:05 by 学员h26Tkc
[考研] 一志愿南京大学,080500材料科学与工程,调剂 +4 Jy? 2026-03-16 4/200 2026-03-17 11:02 by gaoqiong
[考研] 考研调剂 +3 淇ya_~ 2026-03-17 5/250 2026-03-17 09:25 by Winj1e
[考研] 一志愿,福州大学材料专硕339分求调剂 +3 木子momo青争 2026-03-15 3/150 2026-03-17 07:52 by laoshidan
[基金申请] 国自科面上基金字体 +6 iwuli 2026-03-12 7/350 2026-03-16 21:18 by sculhf
[考研] 304求调剂 +3 曼殊2266 2026-03-14 3/150 2026-03-16 16:39 by houyaoxu
[考研] 285求调剂 +6 ytter 2026-03-12 6/300 2026-03-16 15:05 by njzyff
[考研] 0856专硕279求调剂 +5 加油加油!? 2026-03-15 5/250 2026-03-15 11:58 by 2020015
[考研] 求调剂 +5 一定有学上- 2026-03-12 5/250 2026-03-13 18:31 by ms629
[考研] 一志愿211化学学硕310分求调剂 +8 努力奋斗112 2026-03-12 9/450 2026-03-13 15:41 by JourneyLucky
信息提示
请填处理意见