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清新夏青新虫 (小有名气)
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[求助]
蛋白纯化怎么去除核酸
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| 最近做的蛋白是个核蛋白，结合核酸特别强，试过核酸酶，但效果不太好，请问有没有大侠知道还有什么去除核酸的办法 |
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 【分子生物】EPI帖 | 蛋白质生物学实验经验 |
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【答案】应助回帖
★ ★ ★
amisking(金币+3, EPI+1): 鼓励应助 2011-06-30 21:09:30
清新夏青(金币+3): 2011-07-04 13:19:09
amisking(金币+3, EPI+1): 鼓励应助 2011-06-30 21:09:30
清新夏青(金币+3): 2011-07-04 13:19:09
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1、根据你的蛋白的性质，选择合适的介质和条件，想办法把蛋白结合在柱子上，（有tag的话用这个方法最好了），然后用高盐（0.5-3M NaCl）洗，一般会洗下来一个峰，就是被洗下来的核酸了。 2、试试在高盐条件下加Mn2+，因为高盐可以让核酸和蛋白分离，而Mn2+对核酸沉淀有一定的效果。 但是要十分小心的是，这类蛋白本身的天然性质就是要结合核酸的，有的时候核酸去除干净了，蛋白也沉淀了，所以没那么容易，很多小条件要结合你的蛋白自己去摸索。 |
2楼2011-06-30 19:10:23
3楼2011-06-30 19:12:31