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jinpeng_6118木虫 (正式写手)
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[交流]
镍柱纯化蛋白透析出现大量沉淀，请教已有14人参与
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| 昨晚镍柱纯化两个蛋白（脂肪酶），上样量为20ml镍柱纯化1L菌液破碎上清（80ml），最后用50ml 500mM咪唑（50mM Tris·Hcl，0.5mM Nacl，10%甘油 ）洗脱，透析：（1）50mM Tris·Hcl，0.2mM Nacl 3L 透析3h，开始出现沉淀；（2）50mM Tris·Hcl，0.03mM Nacl，3L透析不到1h，就出现比较多的沉淀了，7h后出现大量沉淀。透析一直在4℃下搅拌进行。请教各位高手，是我蛋白变性太快了还是透析过程中什么因素引起的，谢谢 |
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shakespace
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17楼2012-05-19 20:49:14