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jinpeng_6118

木虫 (正式写手)

[交流] 镍柱纯化蛋白透析出现大量沉淀,请教 已有14人参与

昨晚镍柱纯化两个蛋白(脂肪酶),上样量为20ml镍柱纯化1L菌液破碎上清(80ml),最后用50ml  500mM咪唑(50mM Tris·Hcl,0.5mM Nacl,10%甘油  )洗脱,透析:(1)50mM Tris·Hcl,0.2mM Nacl  3L 透析3h,开始出现沉淀;(2)50mM Tris·Hcl,0.03mM Nacl,3L透析不到1h,就出现比较多的沉淀了,7h后出现大量沉淀。透析一直在4℃下搅拌进行。请教各位高手,是我蛋白变性太快了还是透析过程中什么因素引起的,谢谢
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人生百态原为海,看破红尘方为岸!
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pineper

至尊木虫 (著名写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
9楼: Originally posted by ganchao1776 at 2011-07-01 00:14:28
估计是NaCl浓度降低后引起的蛋白聚集

如果是这个原因的话,能够复溶么?
19楼2019-06-14 23:06:19
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