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hooroberts新虫 (小有名气)
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gst标签，蛋白纯化
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大家看看我这目的蛋白，在上清中纯化有希望吗，gst标签的，整了几次没出来，放好久了 ，如果不行的话是不是纯化包涵体也行，gst的是不是变性后腰先复性再纯化，如果复性的话怎么复性？做酶活的，对量不要求多大。  |
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toxicpeach
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那你用包涵体做一次杂交嘛，至少包涵体洗洗就比较纯了。不做杂交还是不放心啊，我师弟就是怎么纯化也没有目的条带才想到做杂交的，结果果然不是，也不排除可溶的那点和包涵体根本就不是一个东西，但是一般有包涵体的话，可溶的也会存在。 另外，楼主用的是什么培养基呢？可以考虑一下基础培养基，低温诱导，可以减少包涵体产生。 膜蛋白不知道你是用什么去垢剂增溶的，溶液里面要用合适的去垢剂才行，好像我们这里纯化膜蛋白都不仅仅是去掉包涵体，收上清，上清还要再高速离心很久，收沉淀，重新溶在有去垢剂的缓冲液里面才能再做纯化。 昨天没有考虑到你做的是膜蛋白，今天又看了下，你这样可能膜还是没有分离好，直接纯化不行的。 |
21楼2011-07-01 12:31:33
2楼2011-06-27 23:08:46
hooroberts
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3楼2011-06-28 21:48:29
落明逐暗
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4楼2011-06-29 10:05:54
