24小时热门版块排行榜

返回列表

本帖产生 1 个 BioEPI ，点击这里进行查看

当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

hooroberts

新虫 (小有名气)

BioEPI: 3
应助: 0 (幼儿园)
金币: -17.9
红花: 1
帖子: 52
在线: 10.8小时
虫号: 1331780
注册: 2011-06-26

[求助] gst标签，蛋白纯化

大家看看我这目的蛋白，在上清中纯化有希望吗，gst标签的，整了几次没出来，放好久了

，如果不行的话是不是纯化包涵体也行，gst的是不是变性后腰先复性再纯化，如果复性的话怎么复性？做酶活的，对量不要求多大。

回复此楼

» 猜你喜欢

药学硕士，第一、第二作者已发表6 篇 SCI，药理方向及相关方向2026年/2027年博士申请已经有6人回复
一篇MDPI论文改变了学习工作和生活已经有5人回复
26年博士申请自荐-电催化已经有3人回复
中国地质大学（北京）博士招生补录，数理学院材料科学与工程专业和材料与化工专业已经有6人回复
收到国自然专家邀请后几年才会有本子送过来评已经有4人回复
考博已经有5人回复
26年申博自荐-计算机视觉已经有4人回复
药化及相关博士的申请已经有3人回复

1楼 2011-06-27 22:55:24

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

toxicpeach

木虫 (正式写手)

BioEPI: 2
应助: 0 (幼儿园)
金币: 3924.3
散金: 196
红花: 2
帖子: 878
在线: 119.8小时
虫号: 1143646
注册: 2010-11-10
性别: MM
专业: 免疫学研究新技术与新方法

那你用包涵体做一次杂交嘛，至少包涵体洗洗就比较纯了。不做杂交还是不放心啊，我师弟就是怎么纯化也没有目的条带才想到做杂交的，结果果然不是，也不排除可溶的那点和包涵体根本就不是一个东西，但是一般有包涵体的话，可溶的也会存在。
另外，楼主用的是什么培养基呢？可以考虑一下基础培养基，低温诱导，可以减少包涵体产生。
膜蛋白不知道你是用什么去垢剂增溶的，溶液里面要用合适的去垢剂才行，好像我们这里纯化膜蛋白都不仅仅是去掉包涵体，收上清，上清还要再高速离心很久，收沉淀，重新溶在有去垢剂的缓冲液里面才能再做纯化。
昨天没有考虑到你做的是膜蛋白，今天又看了下，你这样可能膜还是没有分离好，直接纯化不行的。