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shaquila金虫 (正式写手)
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拟南芥原生质分离实验～～
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配好酶溶液后叶片放进去抽真空40分钟，室温放置5小时，叶片还是没有溶解，原生质基本没啥释放，叶片大小为2-3mm（因为叶龄较老，不好切） 配方： 酶溶液 (10ml): 甘露醇0.4 M, KCl 20mM, MES(0.5M,pH5.7) 20mM, 纤维素酶R10 150mg, 离析酶R10 40mg 在 55℃加入酶溶液10分钟 (失活蛋白酶并增强酶的溶解性)用之前冷却至室温 1M CaCl2 0.1ml 10mM β-巯基乙醇 4μL 5mM 10% FBS (用BSA代替了) 0.1ml 0.1% 过0.45 μm滤器（用0.22代替） 酶溶液要是亮棕色并且澄清 我的酶液是基本无色，纤维素酶R10这个东东是黄色粉末，但是溶解后颜色没有那么深，买的是Cellulase from Aspergillus niger（sigma），离析酶R10是Pectinase from Aspergillus niger（sigma），不知道是不是这两个出问题？ |
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shaquila
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8楼2011-06-24 14:45:05
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