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费云舟

金虫 (初入文坛)

[求助] 大肠杆菌转化时出现异常现象

最近做了好几次大肠杆菌的转化,卡纳抗性板上筛选,平板上有大小两种形态的菌落,大菌落数量少,应该是阳性克隆,小菌落几乎布满全板。
重复了好几次都是这种情况,重新制备过感受态细胞,原始菌也在含卡纳LB中验证了,没有发现增殖。
有人说是转化效率太高,小弟实在是搞不清状况了,特地请教高手。
另外此前做了一次正常,而且酶切片段都没换过,-20°化冻,每次转化前再连接一次。

[ Last edited by 费云舟 on 2011-6-16 at 10:03 ]
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瓶儿花

金虫 (小有名气)

是卫星菌落。原因是时间培养过长,使得抗性菌落分泌一种物质将抗性分解,长出卫星菌落。一般转化后培养12-14h后从培养箱取出防4℃冰箱显色。
10楼2011-08-30 10:14:59
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