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hebeilisbi

铁虫 (小有名气)

[求助] 液相测定 前三个图谱都有倒峰而且基线漂移很严重,这是怎么回事??

请高手给分析原因,给出改进方案

这是我今天跑的液相的图谱,根据文献用了三种方法,但是图谱都不理想,刚接触,也不知道该怎么改进,还请高手指点迷津。我的溶剂是乙酸乙酯。附件是我的图谱,其中样品-1和样品-2是用的等度洗脱,流动相是乙腈和氯仿,样品1是92:8,样品2是95:5,方法二是用的乙腈和乙酸乙酯梯度洗脱,方法三是乙腈:水=88;12作为A相,B相是乙酸乙酯,也是梯度洗脱。前三个图谱都有倒峰而且基线漂移很严重,第四个感觉直接就没分开,还请高手们不吝赐教,小弟感激万分啊!

样品1 乙腈氯仿=98:2等度洗脱


样品2 乙腈氯仿=95:5等度洗脱


方法二 乙腈乙酸乙酯梯度洗脱


方法三 乙腈水和乙酸乙酯梯度洗脱


[ Last edited by hebeilisbi on 2011-6-15 at 10:34 ]
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hebeilisbi

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by leecius at 2011-06-15 11:16:48:
楼主能不能提供所分析样品的关键结构信息?

样品是脂溶性的,应该是极性比较弱。
6楼2011-06-15 15:43:46
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leecius

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

楼主能不能提供所分析样品的关键结构信息?
心似白云常自在,意如流水任东西。
2楼2011-06-15 11:16:48
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痴夷子皮

版主 (文坛精英)

老痞

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

hebeilisbi(金币+1): 2011-06-15 15:42:14
1、前三图基线漂移其实不太严重,注意纵坐标单位及幅度。
2、前三图样品响应值很低,波长的选择是否合理?还是进样浓度太低?
3、前三图的倒峰,可能与流动相的背景吸收有关,也可能与检测波长有关,选用较好的色谱纯试剂,如默克。
4、图四,梯度,方法呢?为何方法二、三进样时间不同?
守候在风中的宁静。
3楼2011-06-15 11:32:29
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hebeilisbi

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by leecius at 2011-06-15 11:16:48:
楼主能不能提供所分析样品的关键结构信息?

类胡萝卜素。主要是C40分子,中央是多聚烯链

用的是反相柱,流动相是参考的别人的方法,我测的是类胡萝卜素,可能这种物质本身极性就很差吧,我也不懂。

流动相是参考的别人的方法,我测的是类胡萝卜素,可能这种物质本身极性就很差吧,我也不懂。

柱子是C18反相柱,填料是硅胶,我进了10ul的样,可能提取方法待改进,谢谢解答
4楼2011-06-15 15:41:57
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