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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 福林酚法是否能很好评价蛋白酶降解大豆蛋白的能力
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dawnwei205

木虫 (小有名气)

[求助] 福林酚法是否能很好评价蛋白酶降解大豆蛋白的能力 已有1人参与

最近在分离筛选一些对大豆蛋白有很好降解的菌株，不知在筛选的过程中哪种蛋白酶对大豆蛋白比较有效，蛋白酶活力是不是能够很好的预测其降解大豆蛋白的能力，因为用的是福林酚法测定蛋白活力，而福林酚法是对主要是特异性评价如酪蛋白之类的蛋白质吧？在做的过程中也发现蛋白酶活力和降解并不成一致关系，一直比较迷惑，请不吝赐教。谢谢
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1楼 2011-06-14 20:07:57
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nancyyazi

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

dawnwei205(金币+1): 2011-06-16 13:02:16
可不可以把底物换成大豆蛋白呢，我觉得酪蛋白只是一个底物，应该可以换的。
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2楼2011-06-16 09:38:21
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dawnwei205

木虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by nancyyazi at 2011-06-16 09:38:21:
可不可以把底物换成大豆蛋白呢，我觉得酪蛋白只是一个底物，应该可以换的。

换成大豆蛋白怎么定量那？大豆蛋白成分还是很复杂的啊！
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3楼2011-06-16 13:02:05
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nancyyazi

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

dawnwei205(金币+1): 2011-06-21 15:42:39
引用回帖:
Originally posted by dawnwei205 at 2011-06-16 13:02:05:
换成大豆蛋白怎么定量那？大豆蛋白成分还是很复杂的啊！

酪蛋白做底物的时候是过量的，所以加大豆蛋白保证过量一些就可以了，这样就可以定量了，关键是看把大豆蛋白分解成多少氨基酸。我是这么认为的。
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4楼2011-06-16 21:39:28
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HarveyWang

捐助贵宾 (知名作家)

海外行者

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
dawnwei205(金币+1): 2011-06-25 19:50:49
scelab(金币+9, EPI+1): xxjl 2011-07-17 10:56:52
引用回帖:
Originally posted by dawnwei205 at 2011-06-14 20:07:57:
最近在分离筛选一些对大豆蛋白有很好降解的菌株，不知在筛选的过程中哪种蛋白酶对大豆蛋白比较有效，蛋白酶活力是不是能够很好的预测其降解大豆蛋白的能力，因为用的是福林酚法测定蛋白活力，而福林酚法是对主要是 ...

不能。

福林酚法主要是通过蛋白质中酪氨酸 的  -OH 侧链来发生电子转移，然后显色的。

你的蛋白酶即使全部降解了大豆蛋白，降解片段的酪氨酸残基还是可以发生 电子转移反应。

但是，大豆蛋白一般是水不溶性的吧。。。？（下面的纯属推测，我没做过大豆蛋白溶解）

如果是这样，那么只要测定10000 rpm-10min 离心后的上清，就可以知道有多少酪氨酸被释放出来了。
就是说，上清中的酪氨酸是随着水解程度的增加而增加的。可以用上清来比色。
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【我一直认为做土匪很性感很坏，很直接，可以大声喊：JCMM我爱你！所以，我自从博士毕业后，就一直在寻找黑道大哥一起去抢钱、抢粮、抢地盘】
5楼2011-06-24 20:08:29
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novodisk

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

蛋白酶的来源太多了，酶的活性值只是酶在最适的温度和PH值条件下测出来的，具体使用时，条件千差万别，比如，有的蛋白酶耐高温，有的就比较差，在高温下使用，耐高温的就比较好用，不耐高温的损失的就快，就不好用，加的量就大，可能耐高温的蛋白酶酶活的活性还不如不耐高温的，所以酶活力和降解不一致很正常。
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6楼2019-01-30 09:43:56
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