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听雪看山

木虫 (职业作家)

西游家族之T所长

优秀版主优秀版主

[求助] 做好的质粒如果用完了,用怎样的步骤繁殖新的,保证质粒的质量啊?

如题


构建好的EYFP质粒,需要看荧光,将其转入拟南芥原生质体里面做亚细胞定位时需要10µg以上的质粒,所以,总是需要很大量。

我将质粒转化到大肠杆菌里面,amp的板子隔夜培养。

一种是挑板子上几个克隆一起共同液体培养,然后纯化出质粒。

一种是挑板子上的单克隆,然后划到另个amp板子上培养数小时,取菌落液体培养
,然后纯化


这两种办法,那种更好啊,帮我分析原因,我很想知道更理论的东西

[ Last edited by 听雪看山 on 2011-6-8 at 21:49 ]
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开花可要欣赏,然后就去远行;唯有不等花开,才能记得花红。
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空谷幽风

金虫 (正式写手)


西瓜(金币+1): 专家很谨慎啊,呵呵 2011-07-23 17:01:39
西瓜的建议很好啊,不过为了确保质粒是稳定增殖的,最好能在前两批每批都测一次序,如果没什么问题以后就可以直接用这种方法来培养了
a?,c??ae~?a,EURc§?c?μé-,cs,,a‘?é?“i1/4?i1/4?i1/4?i1/4?
6楼2011-07-22 21:24:55
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