| 查看: 2181 | 回复: 7 | ||||
| 本帖产生 1 个 MolEPI ，点击这里进行查看 | ||||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||||
[交流]
pGEM-T Easy载体的相关问题-讨论
|
||||
|
大家出来讨论一下吧： 细菌的某个基因发生改变，要看它对细菌其他基因表达水平的影响，就需要将未突变的这段基因连接到载体上，在将其转入存在突变的菌体内，对比转化前后的不同，而得出结论。本实验室没有做过相关实验，请各位说说该实验的难易？注意事项？关键环节？连接体系........ 谢谢！ |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 【分子生物】EPI帖 |
» 本帖已获得的红花（最新10朵）
zhouying_613» 猜你喜欢
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
-
氢氧化钾活化操作
已经有18人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有94人回复
-
散金
已经有68人回复
-
生物质超级电容器
已经有0人回复
-
ALK5 高选择性小分子 LY-3200882：可放大合成路线与质控要点解析
已经有0人回复
-
AM630（CAS 164178-33-0）：CB2 选择性配体的实验使用与供应要点
已经有0人回复
-
ADC标杆分子T-DM1全解析：从结构设计到实验室应用的技术要点
已经有0人回复
-
HILIC磁珠研究蛋白组学怎么做？
已经有0人回复
-
His标签蛋白纯化怎么才能快？
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 提议：今天晚上过了之后，大家就不要再讨论关于材料的问题了，因为：
已经有17人回复
- 【资料】pGEM-T Easy T载体全序列
已经有107人回复
- T载体连接问题
已经有8人回复
- 重大问题，有谁知道pMD18-t等Amp+抗性载体中AmpR的启动子序列是什么？
已经有3人回复
- 【资料】分子生物学常见问题解答
已经有30人回复
- 【求助】基因克隆T载体酶切问题等
已经有8人回复
- complement experiment 相关问题
已经有7人回复
- 129bp小片段从pGEM-T上酶切回收的问题
已经有13人回复
- MALDI-TOF质谱表征聚乳酸问题
已经有16人回复
- 【求助】关于n-BuLi与t-BuLi的摩尔当量问题？
已经有7人回复
- 【求助/交流】pGEM-T Easy载体 T-A 连接 为啥没连入PCR产物的 菌斑是蓝斑
已经有23人回复
- 【求助/交流】关于T载体连接问题
已经有22人回复
8楼2011-06-08 17:17:34
2楼2011-06-08 12:15:18
3楼2011-06-08 13:20:12
天使托
专家顾问 (职业作家)
-
专家经验: +57 - MolEPI: 106
- 应助: 95 (初中生)
- 贵宾: 0.263
- 金币: 16299.3
- 帖子: 3659
- 在线: 290.6小时
- 虫号: 441757
★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
dhd997(金币+5, EPI+1): 2011-06-08 14:44:24
475502411(金币+5): 2011-06-08 16:29:59
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
dhd997(金币+5, EPI+1): 2011-06-08 14:44:24
475502411(金币+5): 2011-06-08 16:29:59
|
这个比较容易做。。。 首先你要先将目的基因（就是你要检测该基因是否在突变体中的表达发生变化了）和载体连接上，当然这个是连接问题了，连接我觉得楼主应该没有什么问题吧？ 其实验证连接好之后，将重组载体转化进突变体中，同时将该重组载体转化进野生型菌中，然后对比两个重组载体上的目的基因的表达是否发生变化，当然了，这个后期检测可以用发光，表达量等等来检测。。。 其实还有另外一种方法可以达到楼主的需要，就是DNA microassay.你可以将你的突变体的mRNA提取出来，然后反转录成cDNA,然后交由生物公司做一个基因芯片，这样你就会知道你的突变体里面哪些基因的表达发生变化了，就方便你寻找整调节或者负调节的基因了。 |
4楼2011-06-08 14:25:04