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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 请教MTT实验96孔板种板密度问题
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2011加油

银虫 (正式写手)

[交流] 请教MTT实验96孔板种板密度问题

MTT实验96孔板种板密度问题：

一、请问大家是通过计数板来先确定细胞密度，再稀释成合适的密度进行种板吗？
若是该情况，种板的密度大概是多少个每毫升？

二、还是根据经验，判断细胞在培养瓶中长到一定程度，就直接种板，不用经过计数板计数来确定细胞密度？
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1楼 2011-06-07 16:15:48
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wangleimin

木虫 (正式写手)
★
2011加油(金币+1): 谢谢参与
既然你是贴壁细胞，按照说明，理论上10000个每孔（200ul），实际在消化时可能会损伤一些细胞，最好10000以上，
赞一下(2人) 回复此楼
14楼2013-04-09 16:50:07
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轻涛低语

铜虫 (初入文坛)
★ ★ ★ ★
2011加油(金币+1):谢谢参与
西瓜(金币+3): 鼓励交流。经验很丰富啊！ 2011-06-07 23:22:41
2011加油(金币+1): 谢谢啊 2011-06-08 16:39:35
最好是细胞计数啦，但是基本上我们操作中都是凭经验的，就是在培养瓶中长到80%就可以种3块板，但是我们养的是癌细胞，很容易长的
赞一下(3人) 回复此楼
3楼2011-06-07 21:41:30
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xueshu110

禁虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★
2011加油(金币+1):谢谢参与
2011加油(金币+1): 2011-06-08 16:38:34
西瓜(金币+3): 鼓励交流 2011-06-08 18:42:03
本帖内容被屏蔽
4楼2011-06-08 15:16:02
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2011加油

银虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by xueshu110 at 2011-06-08 15:16:02:
我们实验室是细胞计数，这是必经环节，至于你说的凭经验种板我不知道，密度一般为10*5/ml。另我查了资料。说对于非粘附细胞，一般浓度为5*103-100*10*3，仅接种100微升于96孔板中。

谢谢啊，我用的细胞也是属于贴壁生长的细胞，之前按6000个每孔接种，发觉阴性对照组的吸光度值很低（0.2多一些），估计是种板密度过小。
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5楼2011-06-08 16:39:13
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su-b0812楼
2013-01-02 00:46   回复  
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