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请教MTT实验96孔板种板密度问题
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2011加油
银虫
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[交流]
请教MTT实验96孔板种板密度问题
MTT实验96孔板种板密度问题:
一、请问大家是通过计数板来先确定细胞密度,再稀释成合适的密度进行种板吗?
若是该情况,种板的密度大概是多少个每毫升?
二、还是根据经验,判断细胞在培养瓶中长到一定程度,就直接种板,不用经过计数板计数来确定细胞密度?
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2011-06-07 16:15:48
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wangleimin
木虫
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虫号: 1352062
★
2011加油(金币+1): 谢谢参与
既然你是贴壁细胞,按照说明,理论上10000个每孔(200ul),实际在消化时可能会损伤一些细胞,最好10000以上,
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14楼
2013-04-09 16:50:07
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铜虫
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★ ★ ★ ★
2011加油(金币
+1
):谢谢参与
西瓜(金币+3): 鼓励交流。经验很丰富啊! 2011-06-07 23:22:41
2011加油(金币+1): 谢谢啊 2011-06-08 16:39:35
最好是细胞计数啦,但是基本上我们操作中都是凭经验的,就是在培养瓶中长到80%就可以种3块板,但是我们养的是癌细胞,很容易长的
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3楼
2011-06-07 21:41:30
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xueshu110
禁虫
(正式写手)
★ ★ ★ ★
2011加油(金币
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):谢谢参与
2011加油(金币+1): 2011-06-08 16:38:34
西瓜(金币+3): 鼓励交流 2011-06-08 18:42:03
本帖内容被屏蔽
4楼
2011-06-08 15:16:02
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2011加油
银虫
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引用回帖:
Originally posted by
xueshu110
at 2011-06-08 15:16:02:
我们实验室是细胞计数,这是必经环节,至于你说的凭经验种板我不知道,密度一般为10*5/ml。另我查了资料。说对于非粘附细胞,一般浓度为5*103-100*10*3,仅接种100微升于96孔板中。
谢谢啊,我用的细胞也是属于贴壁生长的细胞,之前按6000个每孔接种,发觉阴性对照组的吸光度值很低(0.2多一些),估计是种板密度过小。
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5楼
2011-06-08 16:39:13
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su-b08
12楼
2013-01-02 00:46
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