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长乐未央_CL

新虫 (小有名气)

[求助] 样品与SDS煮沸后的样品冰箱冷藏能保存多久?这样的变性样品在期间会降解吗?

样品与SDS煮沸后的样品冰箱冷藏能保存多久?这样的变性样品在期间会降解吗?请问附件图片中的背景很重是因为样品降解的原因吗?谢谢
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gppwfh

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
dhd997(金币+2): good 2011-06-07 16:53:26
引用回帖:
Originally posted by mygoalcas at 2011-06-06 23:46:44:
刚才上百度又看到了几条原因,给你贴过来参考一下

7. 为什么带出现拖尾现象?   主要是样品融解效果不佳或分离胶浓度过大引起的。   处理办法:加样前离心;选择适当的样品缓冲液,加适量样品促溶剂;电泳 ...

夏天温度高了,不管是分离胶还是浓缩胶,结合的都会快一些。我们冬天都是放烘箱里聚合的,现在直接室温就行了
7楼2011-06-07 14:46:14
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shuifen1108

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
1949stone(金币+2): 同意 2011-06-04 12:25:46
蛋白质与loading buffer混合后煮沸变形后放在冰箱中储存应该是不会降解的,你这个是不是跑胶的问题,跑胶缓冲溶液用过太多次,还有就是电压
2楼2011-06-04 12:23:27
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yj507

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
西瓜(金币+5, EPI+1): 很有经验哦,分析得很好,EPI当之无愧! 2011-06-07 00:17:44
与loading煮过的蛋白样品在4度放的话会降解的,不过不会这么快,可能1个月左右开始吧,-20放会好些。看你的图所有的条带都不清晰,可能是胶配制或跑电泳的问题,不知道你的marker条带是否清晰,如果也不清晰更可能是胶的问题;另外在冰箱里低温跑电泳效果会好些。
3楼2011-06-04 13:11:45
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terry130

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
西瓜(金币+5): Good! 2011-06-07 00:18:48
用一个新鲜的同源样品跟旧样一起跑一下就能找到原因了,做实验自己去排除问题是很重要的。除了LS说的原因为,还有一个可能是你的样品本身就是很杂,比如菌体的总蛋白提取液,加之你上样量过大,就会得到这种成片的条带。。。
摒气动方息,宁神心自明。
4楼2011-06-06 08:47:37
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