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yuxia82012

木虫 (著名写手)

[求助] gel-shift蛋白结合DNA的问题

最近做gelshift研究蛋白与DNA的结合,在用不同量得蛋白与DNA反应后,跑5%的非变性聚丙烯酰胺凝胶,扫图见下,这个结果看出来是结合了,但是感觉有点不正常,主要是跑完后,在同样的曝光度下,蛋白量加的多的泳道DNA信号很弱,加大曝光度后可以明显看见上面有结合,不知道这是不是有问题,怎么证明这个蛋白是特异结合这段DNA而不是随便什么DNA都能结合呢?
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yuxia82012

木虫 (著名写手)

我做的是一个调控基因机理的研究,也就是这个调控蛋白通过结合到特异基因的启动子区域来调控下游基因的表达,这个实验就是测试这个调控蛋白是否真的和预测的启动子基因序列有结合作用的
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6楼2011-06-23 15:13:29
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yuxia82012

木虫 (著名写手)

自己顶一下,别沉了
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2楼2011-06-03 09:43:16
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爱mm

木虫 (著名写手)

我想请教一下,你的蛋白和DNA是怎么结合的?氨基羧基,还是适体结合?两者结合后,结合了蛋白的DNA跑的慢,而没有结合的跑的快,是这个原理吗?
木虫给力!
3楼2011-06-23 09:05:30
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yuxia82012

木虫 (著名写手)

★ ★
西瓜(金币+2): 鼓励交流 2011-06-23 14:40:19
引用回帖:
Originally posted by 爱mm at 2011-06-23 09:05:30:
我想请教一下,你的蛋白和DNA是怎么结合的?氨基羧基,还是适体结合?两者结合后,结合了蛋白的DNA跑的慢,而没有结合的跑的快,是这个原理吗?

应该是适体结合,结合后的复合体跑得慢,就是这个原理
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4楼2011-06-23 10:40:16
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