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hubayi

新虫 (初入文坛)

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[求助] 有人知道毕赤酵母氯化锂转化里面鲑鱼精怎么配制的不？

如题，希望各位大哥大姐帮帮小弟，知道的留个言。
具体的配制方法溶液浓度都给小弟介绍下
谢谢哈

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1楼 2011-06-01 21:40:25

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hubayi

新虫 (初入文坛)

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引用回帖:

Originally posted by diduqiong at 2011-06-02 14:43:32:
很麻烦很麻烦，当时配了两天
取50mg鲑鱼精，加4mlTE,用Tip上下抽吸使其溶解，打碎至分子量在2Kb-20Kb之间（跑电泳验证，跑一微升即可），然后苯酚氯仿抽提，然后加NaAc，然后用异丙醇沉淀，70%的乙醇洗涤，加TE至 ...

请问，各种试剂的浓度，比例，还有用量各是多少呢？
希望您能帮帮我，谢谢

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3楼2011-06-02 15:45:57

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diduqiong

木虫 (初入文坛)

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【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
dhd997(金币+6, EPI+1): 一并奖励 2011-06-02 18:49:57

很麻烦很麻烦，当时配了两天
取50mg鲑鱼精，加4mlTE,用Tip上下抽吸使其溶解，打碎至分子量在2Kb-20Kb之间（跑电泳验证，跑一微升即可），然后苯酚氯仿抽提，然后加NaAc，然后用异丙醇沉淀，70%的乙醇洗涤，加TE至终浓度为2mg∕ml，沸水煮20分钟变性，分装后负20度保存。
注意在沸水煮后测一下染色体浓度，然后算一下加多少TE,毕赤酵母醋酸锂转化里有用到10×TE，这里溶鲑鱼精的是1×TE，可以用那个稀释一下，稀释前灭下菌

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