应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 求助：real-time PCR数据结果如何处理？
11/1返回列表
查看: 1853  |  回复: 2
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
本帖产生 1 个 BioEPI ，点击这里进行查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

adslye

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
silicare(金币+8, EPI+1): very good 2011-05-22 16:02:26
happy-j(金币+1): 2011-05-24 11:48:46
首先你要理解2^（-△△Ct 这个公式：
第一个△ 是目的基因减内参基因endogenous control.目的就是排除组内差异啦（内参的功能嘛）。
第二个△是第一个△的值减去对照组 reference sample.目的就是在比较时找一个标准（表达量是比它高呢还是低呢）
这个2就是默认扩展效率为1时，PCR每循环扩增的倍数了。
明白了上面的，你还要在软件设置：
1.replicates。就是重复次数啦，最少2次。
2.biological relicate groups .生物学重复次数。这个就是你实验重复次数。建议3次以上。

设置好以上（英文单词）选项，各种牌子的机子自带的软件就能帮你算出结果，并且绘制出表达差异柱状图。
PS. 你画的那个实验图。我理解实验组1,2,3，是3种不同处理。而对照1,2,3，也不相同。 这样会绘制3个柱状图。分别是每个处理组相对它对应的对照组的柱状图。
它的计算过程是：△△Ct=（CT实验组1-CT实验组1内参）-（CT对照组1-CT对照组1内参）。得到的是目的基因在实验组1条件下相对对照组1的表达量。比方说X基因在给药后A后提高了5倍表达。同理你2,3，实验的结论是：在给药B,C后表达调高几倍。

最后，再次强调，这是计算机会自己算的。你只要设置好这些。另外额外提示：△△Ct法要求引物扩展效率一致。要提前做这个预实验哦。
祝实验顺利。
赞一下(3人) 回复此楼
3楼2011-05-21 22:52:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

智能机器人

Robot (super robot)

我们都爱小木虫

找到一些相关的精华帖子，希望有用哦~

科研从小木虫开始，人人为我，我为人人
相关版块跳转 我要订阅楼主 happy-j 的主题更新
11/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭