应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 枯草芽孢杆菌抗性基因的反敲除
51/1返回列表
查看: 1789  |  回复: 4
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

hkfgwww

银虫 (正式写手)

[求助] 枯草芽孢杆菌抗性基因的反敲除

枯草芽孢杆菌抗性基因的反敲除


枯草芽孢杆菌敲除了一个基因，用PUC19作为母体构建同源片段做的，为了筛选带上了红霉素抗性基因，如何反敲除掉红霉素基因呢？

在谷棒内可用sacB，枯草不能用啊，郁闷！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
微生物发酵
1楼 2011-05-17 10:42:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hkfgwww

银虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by yguang at 2011-05-17 13:42:39:
你可以借鉴一下Red同源重组，现在红霉素抗性基因两端加上FLP，然后再利用FLP去除红霉素抗性基因。

这个你试过吗？因为red重组效率很高，而枯草的转化效率和重组效率很低的。

还有这个理论上可行吗？red重组不太懂。
赞一下 回复此楼
微生物发酵
3楼2011-05-17 16:43:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答

yguang

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

hkfgwww(金币+4): 2011-05-17 16:42:11
你可以借鉴一下Red同源重组，现在红霉素抗性基因两端加上FLP，然后再利用FLP去除红霉素抗性基因。
赞一下 回复此楼
2楼2011-05-17 13:42:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yguang

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

hkfgwww(金币+1): 2011-05-24 08:15:09
hkfgwww(金币+15): 2011-06-03 08:58:48
不是让你做Red，你可以还用质粒转化进行同源重组，只是在抗性标记两端加上FLP而已！
赞一下 回复此楼
4楼2011-05-17 20:38:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

285459331

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by yguang at 2011-05-17 20:38:42:
不是让你做Red，你可以还用质粒转化进行同源重组，只是在抗性标记两端加上FLP而已！

也可以用一些反抗性标记，这方面文章不少，南京农业大学就有做的。
赞一下 回复此楼
生命不止，奋斗不息
5楼2011-06-03 08:56:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 应该是93bebmhtak前后十一个字符比较关键 +17 Lanmanbaby 2026-08-09 27/1350 2026-08-11 21:12 by klxdzh
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 yPv6ndDtiRxQ 2026-08-11 3/150 2026-08-11 20:51 by thgx1vqMqrLw
[博后之家] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 yPv6ndDtiRxQ 2026-08-10 7/350 2026-08-11 20:39 by thgx1vqMqrLw
[基金申请] 小木虫上这么多卖论文的，真有人买论文么？感觉没必要啊 +8 Tide man 2026-08-10 9/450 2026-08-11 20:39 by beefly
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 yPv6ndDtiRxQ 2026-08-10 8/400 2026-08-11 19:56 by thgx1vqMqrLw
[基金申请] 帮忙看看fileCode +7 wwncly 2026-08-10 13/650 2026-08-11 19:36 by 冰心玉壶晴
[基金申请] 什么时候出结果，有咨询渠道？？？ +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
[论文投稿] 职称评审，求友友推荐见刊最快的期刊 +3 工厂打螺丝 2026-08-08 3/150 2026-08-11 13:42 by 会议编辑
[基金申请] filecode +9 documentary 2026-08-10 9/450 2026-08-11 10:08 by wk7465
[基金申请] 我的国基提前知道中了，可是同事的操作让我实在接受不了，怎么会有这样的人 +8 家与远方 2026-08-10 13/650 2026-08-11 09:49 by 家与远方
[基金申请] 综述论文作为代表作会不会影响评审专家的印象分？ +10 yufeiwaner 2026-08-09 11/550 2026-08-10 18:47 by yufeiwaner
[基金申请] 好奇怪的filecode +4 布布和一二 2026-08-08 5/250 2026-08-10 14:20 by 冰心玉壶晴
[基金申请] 关于filecode，很负责任的告诉大家 +6 爱看书的可乐 2026-08-08 7/350 2026-08-08 22:13 by a_niu
[基金申请] 关于豆爷回答的JTJC与%2F数量 +5 yang182083 2026-08-06 7/350 2026-08-08 18:29 by zhanghaozhu
[基金申请] filecode变化情况 +6 布布和一二 2026-08-07 22/1100 2026-08-07 14:45 by 且听虎啸
[基金申请] filecode +14 等待解的谜 2026-08-06 19/950 2026-08-07 12:20 by wlwhappy
[基金申请] filecode +8 布布和一二 2026-08-06 11/550 2026-08-06 20:41 by tangpu318
[基金申请] 求各位大神看下 100+6 hpkpkpkp 2026-08-05 33/1650 2026-08-06 14:49 by zhiyanjiang
[基金申请] 影响面上的因素 +8 布布和一二 2026-08-05 11/550 2026-08-06 10:41 by 宝贝虫子
[基金申请] 好消息？这个有何含义？？？ +8 Tide man 2026-08-05 10/500 2026-08-05 16:14 by xmuxiaoyu
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭