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hkfgwww

银虫 (正式写手)

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[求助] 枯草芽孢杆菌抗性基因的反敲除

枯草芽孢杆菌抗性基因的反敲除

枯草芽孢杆菌敲除了一个基因，用PUC19作为母体构建同源片段做的，为了筛选带上了红霉素抗性基因，如何反敲除掉红霉素基因呢？

在谷棒内可用sacB，枯草不能用啊，郁闷！

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微生物发酵

1楼 2011-05-17 10:42:18

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yguang

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【答案】应助回帖

hkfgwww(金币+4): 2011-05-17 16:42:11

你可以借鉴一下Red同源重组，现在红霉素抗性基因两端加上FLP，然后再利用FLP去除红霉素抗性基因。

2楼2011-05-17 13:42:39

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yguang

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【答案】应助回帖

hkfgwww(金币+1): 2011-05-24 08:15:09
hkfgwww(金币+15): 2011-06-03 08:58:48

不是让你做Red，你可以还用质粒转化进行同源重组，只是在抗性标记两端加上FLP而已！

4楼2011-05-17 20:38:42

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