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ralin

铜虫 (初入文坛)

[求助] 免疫共沉淀后怎样去除抗体?

最近做免疫共沉淀,protein G拉下来的东西跑电泳后Western,用目标基因的抗体检测,每次抗体的带都杂交的很亮,而目标基因的带非常微弱,问一下有没有办法CIP后把抗体去除掉或者分离开,由于刚开始做免疫的实验,很多地方都不是很懂,希望得到大家的帮助
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【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
西瓜(金币+5): Good! 2011-05-12 01:10:20
ralin(金币+1): 谢谢 2011-05-13 20:33:30
你的目的蛋白条带分子量多少?抗体的条带应该是25KD轻链和55KD重链两个位置吧?jackson有单一识别轻链的二抗,重链位置不会杂出条带,这样就可以避免重链的干扰。要是目的蛋白靠轻链较近,你不妨去找找有木有只识别重链的二抗,避免轻链的干扰。要想从样品中将抗体分离出来恐怕有难度。http://www.jacksonimmuno.com/Catalog/affinipure.asp
2楼2011-05-11 22:58:01
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