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cyq880205金虫 (小有名气)
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[求助]
SDS-PAGE求助~~HELP!
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最近几次制胶都长时间不凝，望高手帮忙分析一下 分离胶12% H20 3.3ml 30% 4ml 1.5M HCl-Tris (8.8) 2.5ml 10% SDS 0.1ml 10% AP 0.1ml TEMED 10ul 浓缩胶5% H2O 2.1ml 30% 0.5ml 1.0M HCl-Tris 0.38ml 10% SDS 30ul 10% AP 30ul TEMED 3ul 分离胶加大TEMED的量到20uL也不凝，用水封了，时间还是较长，浓缩胶问题比较严重好几个小时都不凝，催化剂量也加大了，还是不凝，用水做实验也不凝，30%Acr-Bis也是新配的，AP也重新配了，大家帮帮忙啊，冬天同样的配方都能凝的 [ Last edited by cyq880205 on 2011-5-3 at 10:16 ] |
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poog502
木虫 (正式写手)
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- 在线: 492小时
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- 专业: 果树学
【答案】应助回帖
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按下面的顺序配制聚丙烯酰胺凝胶（Arc：Bis =29:1）（20ml，12%）； 水(或10-13%甘油) 6.6ml 30%丙烯酰胺溶液 8ml 1.5M Tris（pH8.8） 5ml 10% SDS 200μL 10% 过硫酸铵 200μL TEMED 15μL (3) 混匀，灌胶； (4) 在凝胶液面上小心加水覆盖，以使界面平滑。 (5) 等凝固后再配制浓缩胶（5ml，5%）； 水(或10-13%甘油) 3.4ml 30%丙烯酰胺溶液 850μL 1M Tris（pH6.8） 675μL 10% SDS 50μL 10% 过硫酸铵 50μL TEMED 5μL 刚做完的实验，很清晰的图片 |
16楼2011-05-05 20:43:07