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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 菌液扩摇为什么老摇不出来呢
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zwx26_2006

银虫 (小有名气)

[求助] 菌液扩摇为什么老摇不出来呢

T Easy载体转化DH 5α，小摇能摇出来，PCR也能检测出来，就是大摇要不出来，都20个小时了，一点都不混，到底是什么原因呢？
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1楼 2011-04-29 13:57:24
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蓝月望宁

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
1949stone(金币+3): 鼓励 2011-04-29 19:03:10
zwx26_2006(金币+1): 2011-05-03 16:54:04
引用回帖:
Originally posted by zwx26_2006 at 2011-04-29 06:57:24:
T Easy载体转化DH 5α，小摇能摇出来，PCR也能检测出来，就是大摇要不出来，都20个小时了，一点都不混，到底是什么原因呢？

看看条件改变了吗？还有大遥时，液体培养基放了多少，考虑下溶氧的问题。，另外，放大瓶里虽然看起来不混浊，实际上已经有很多菌体了，因为液体多，相对菌体就少了。期待答案！！
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坚持，一秒钟，就离，成功，近一步！
2楼2011-04-29 15:04:24
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天使托

专家顾问 (职业作家)

T.Shen

【答案】应助回帖

★ ★
1949stone(金币+2): 鼓励交流 2011-04-29 19:03:23
小摇是多大速度？
大摇呢？
你恒速恒温摇就可以了。。。
赞一下(1人) 回复此楼
Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!
3楼2011-04-29 15:28:17
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bujunyang

木虫 (正式写手)

卓尔不群

【答案】应助回帖

★ ★
1949stone(金币+2): 鼓励交流 2011-04-29 19:03:34
小摇有假的可能！提质粒鉴定吧。注意PCR试剂是否污染了，做阴性对照！！！！
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来是偶然，去是必然。
4楼2011-04-29 15:38:53
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clare420

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
1949stone(金币+2): 鼓励交流 2011-04-29 19:03:45
你把大摇的菌液放进小管子里，离心，看有没有沉淀
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2011-04-29 15:47:22
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郝钊

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
西瓜(金币+2): 鼓励交流 2011-04-29 23:37:34
zwx26_2006(金币+9): 2011-05-09 19:53:09
如果质粒转进去了，大摇小摇都应该是一样的。你大摇时的种子从哪里来？小摇转接还是挑的单菌落？抗生素你确定没有加错？建议你再挑单菌落培养一下，你这个不是什么大问题。
赞一下(1人) 回复此楼
6楼2011-04-29 19:19:03
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东林党人

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

是不是培养基配得有问题啊？
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7楼2011-04-30 08:44:42
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meizishu

禁虫 (小有名气)
本帖内容被屏蔽
8楼2011-04-30 10:06:58
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roomofxw

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

不排除污染噬菌体了
飘 飘 飘过去
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9楼2011-04-30 14:15:31
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leiyunting

木虫 (著名写手)

云海波涛

【答案】应助回帖

如果没被污染的话，有可能你挑取的菌落活性不足，你可以先小摇，然后再大摇；也可以加大转速，多摇一些时间吧。

我没遇到过这样的问题，仅供参考
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云海漾空阔，风露凛高寒；何必在波涛，然后惊沉浮。
10楼2011-05-03 14:53:30
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