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fustar08

木虫 (小有名气)

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注册: 2008-01-03
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专业: 食品科学基础

[求助] 急求关于几丁质酶酶谱的问题

几丁质酶谱方法：几丁质酶酶谱分析采用荧光法参照Trudel和Asselin的方法:离胶中加入100 mg/L乙二醇几丁质,将电泳完的分离胶用100 mmol/L的乙酸钠溶液(pH 5.0)配成
的10 ml/L Triton X-100复性24 h,再用50 mmol/L Tris-HCl缓冲液(pH 8.9)配制的100 mg/L荧光增白剂28荧光染料染色5 min,再用蒸馏水洗1 h,然后将分离胶放置在紫外灯下观察,几丁质酶带显示出一条暗带。

问题：1.刚开始几次做酶谱是暗带，但是后来有蛋白的地方都是亮带，不明白原因请大虾帮忙。
2. 乙二醇几丁质配置的浓度是10mg/mL，但是非常难溶，呈胶状。是不是其分散问题使得酶谱没有暗带呢？但是前几次都是同样的操作和试剂，结果却重复不出来，请教大家啦，衷心感谢

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