应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » PICZaA在GS115内表达跨膜蛋白
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
51/1返回列表
查看: 2060  |  回复: 30
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

pidou213

超级版主

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！

[求助] PICZaA在GS115内表达跨膜蛋白

1，PICZaA在GS115内的分泌表达后，上清主要有什么蛋白？一般在多大KD的？
2，PICZaA在GS115内表达跨膜蛋白的时候，跨膜蛋白的跨膜区需要处理掉吗？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
见得多爱的多
1楼 2011-04-28 17:16:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

pidou213

管理员

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！
引用回帖:
Originally posted by susizheng at 2011-04-30 11:09:26:
酵母表达很烦吗？我从质粒构建到整合到表达到纯化，一共化了两个星期。
不是我让你试，是你的蛋白要想做出最优的表达，是不得不试，你看些综述就知道了。
做实验本来就是纸上得来终觉浅，绝知此事要躬行的。

我从质粒构建到整合到表达到纯化，一共化了两个星期。


我真的很佩服你 对不起，碰上高手了

但是据我所知，载体构建后需要测序验证，然后转化后 酵母需要培养2-3天才能长出。然后你还要再次确定是否转化进去了（——也就是说是否是假阳性），然后诱导表达 需要至少鉴定四天的 再然后 做Western 至少一天才能出结果把？

两个星期 我实在佩服
赞一下 回复此楼
见得多爱的多
6楼2011-04-30 18:32:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 31 个回答

susizheng

主管区长

我們是糖 甜到憂傷

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！

【答案】应助回帖

★ ★ ★
1949stone(金币+3): 高手高高手 2011-04-28 19:00:40
pidou213(金币+1): 还是应该感谢一下 2011-04-29 08:37:10
pidou213(金币+1): 讲的有道理 2011-05-10 12:31:38
pidou213(金币+1): 再加一个 2011-07-01 12:30:35
pidou213(金币+2): xx 2011-07-17 16:24:06
1.这个应该需要通过跑PAGE来确定。
2.最好除掉，因为分泌用的是PICZaA上的a factor。不切掉跨膜区，表达时，酵母不一定能够正确的去剪切。
如果我做，估计得切跨膜区做一个，不切做一个。做个对照，因为最终酶活最能说明问题。
赞一下(1人) 回复此楼
Thank-you，so-blue.
2楼2011-04-28 17:54:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

pidou213

专家顾问

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！
引用回帖:
Originally posted by susizheng at 2011-04-28 17:54:51:
1.这个应该需要通过跑PAGE来确定。
2.最好除掉，因为分泌用的是PICZaA上的a factor。不切掉跨膜区，表达时，酵母不一定能够正确的去剪切。
如果我做，估计得切跨膜区做一个，不切做一个。做个对照，因为最终酶活 ...

首先感谢你的回复，但是我想说的是，我之所以求助，就是因为我不确定，所以想找人来指导一下，结果你说了半天都是拿不定的答案，并且你也知道，做这个酵母表达很麻烦的，如果我自己有时间试一试的话，我还来求助做什么呢
赞一下 回复此楼
见得多爱的多
3楼2011-04-29 08:36:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

pidou213

实习版主

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！
引用回帖:
Originally posted by susizheng at 2011-04-28 17:54:51:
1.这个应该需要通过跑PAGE来确定。
2.最好除掉，因为分泌用的是PICZaA上的a factor。不切掉跨膜区，表达时，酵母不一定能够正确的去剪切。
如果我做，估计得切跨膜区做一个，不切做一个。做个对照，因为最终酶活 ...

1.这个应该需要通过跑PAGE来确定

这个问题，我的意思是想问问做过的人，拿张图或者根据自己的所知来回答，结果你说用PAGE胶来确定，你实在是太实在了，我相信做蛋白的就知道用PAGE来确定蛋白的吧？@
赞一下 回复此楼
见得多爱的多
4楼2011-04-29 08:38:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 31 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 调剂推荐 +7 清酒714 2026-03-26 8/400 2026-03-31 22:12 by 544594351
[考研] 一志愿西交大080500材料学硕349 +6 jqx1258 2026-03-31 7/350 2026-03-31 21:08 by yuq
[考研] 一志愿北京科技大学085601材料工程英一数二初试总分335求调剂 +4 双马尾痞老板2 2026-03-31 4/200 2026-03-31 21:08 by Wang200018
[考研] 318求调剂 +3 笃行致远. 2026-03-31 3/150 2026-03-31 20:27 by 求调剂zz
[考研] 求调剂 +9 akdhjs 2026-03-31 10/500 2026-03-31 17:14 by zhyzzh
[考研] 086000生物与医药 初试274求调剂 +4 小叮当来了 2026-03-30 4/200 2026-03-31 16:48 by shengliu165
[考研] 085601 329分调剂 +6 yzsa12 2026-03-31 6/300 2026-03-31 15:23 by yanflower7133
[考研] 学硕274求调剂 +17 Li李鱼 2026-03-26 17/850 2026-03-31 15:19 by 客尔美德
[考研] 277跪求调剂 +8 1915668 2026-03-27 13/650 2026-03-31 14:58 by 王亮_大连医科大
[考研] 生物学 296 求调剂 +7 朵朵- 2026-03-26 9/450 2026-03-31 14:26 by jp9609
[考研] 354求调剂 +3 lxb598 2026-03-31 4/200 2026-03-31 13:42 by sophie2180
[考研] 一志愿浙江大学工科动力工程370,数一121,专业课135，现在能去哪里 +3 080700调剂 2026-03-30 4/200 2026-03-31 12:00 by KLMY666
[考研] 哈尔滨工业大学材料与化工专硕378求调剂 +3 塔比乌斯 2026-03-30 3/150 2026-03-30 22:55 by 无际的草原
[考研] 0703化学321分求调剂 +10 三dd. 2026-03-30 11/550 2026-03-30 19:24 by markhwc
[考研] 一志愿北京工业大学，324分求调剂 +6 零八# 2026-03-28 6/300 2026-03-29 21:20 by nanaliuyun
[考研] 327求调剂 +6 汲亦昊 2026-03-29 6/300 2026-03-29 13:40 by peike
[考研] 本科新能源科学与工程，一志愿华理能动285求调剂 +3 AZMK 2026-03-27 5/250 2026-03-28 16:19 by xxxsssccc
[考研] 0856，材料与化工321分求调剂 +12 大馋小子 2026-03-27 13/650 2026-03-28 10:56 by self2008
[考研] 调剂 +4 柚柚yoyo 2026-03-26 4/200 2026-03-26 20:43 by fmesaito
[考研] 302求调剂 +4 锦衣卫藤椒 2026-03-25 4/200 2026-03-25 16:29 by 功夫疯狂
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭