[求助] PICZaA在GS115内表达跨膜蛋白

Originally posted by susizheng at 2011-04-28 17:54:51:
1.这个应该需要通过跑PAGE来确定。
2.最好除掉，因为分泌用的是PICZaA上的a factor。不切掉跨膜区，表达时，酵母不一定能够正确的去剪切。
如果我做，估计得切跨膜区做一个，不切做一个。做个对照，因为最终酶活 ...

Originally posted by susizheng at 2011-04-28 17:54:51:
1.这个应该需要通过跑PAGE来确定。
2.最好除掉，因为分泌用的是PICZaA上的a factor。不切掉跨膜区，表达时，酵母不一定能够正确的去剪切。
如果我做，估计得切跨膜区做一个，不切做一个。做个对照，因为最终酶活 ...

Originally posted by susizheng at 2011-04-30 11:09:26:
酵母表达很烦吗？我从质粒构建到整合到表达到纯化，一共化了两个星期。
不是我让你试，是你的蛋白要想做出最优的表达，是不得不试，你看些综述就知道了。
做实验本来就是纸上得来终觉浅，绝知此事要躬行的。

Originally posted by roomofxw at 2011-04-30 23:22:09:
做的顺手的话，中间不出什么问题
e.coli大约也就只要一周时间左右呗，酵母费劲点，长的慢些，但也要不了太久。

当然中间不出问题，不需要优化…要是有问题了，那可能两年也做不出来

Originally posted by roomofxw at 2011-05-02 21:06:42:
北京

Originally posted by roomofxw at 2011-05-03 16:30:58:
不是，你猜不到猜不到猜不到的

Originally posted by roomofxw at 2011-05-03 16:30:58:
不是，你猜不到猜不到猜不到的

Originally posted by roomofxw at 2011-05-03 19:02:59:
从哪里看出来我上学呢
要是去年，学院路就那几个学校，肯定能猜出来
现在就比较困难了

Originally posted by roomofxw at 2011-05-04 08:27:04:

工作了，怎么就可惜了呀~~~
我也上过大学呀……