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caojinxuan

银虫 (正式写手)

[求助] 有关SDS-PAGE电泳

大家好,有些关于SDS-PAGE的电泳问题请教大家
1  本人在电泳过程中刚开始样品在浓缩胶中使用的是80V电压,可是条带跑得很慢,差不多要跑2个小时才能到分离胶,这是为什么?
2  后来样品进入分离胶后使用的电压是120V,但速度太慢,就改为160V,发现外板很烫,不知道这样会不会影响最后的结果?
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rhy1027

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

温度太高的话会导致样品扩撒严重,条带变糊了!可以考虑调整一下running buffer的离子强度,然后跑胶的时候可以给里面放个冰盒,或者把电泳槽埋在冰里跑!不过普通的SDS-PAGE很少会发热严重的情况!Native PAGE常见,跑过夜都很正常。
9楼2011-04-27 12:43:03
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lxj341401

至尊木虫 (著名写手)

★ ★
dhd997(金币+2): 有可能 2011-04-25 09:52:42
可能是电泳缓冲液的问题,浓度不对或者用的次数多了。
2楼2011-04-23 19:42:10
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elvias

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

caojinxuan(金币+8): 2011-04-25 09:25:43
你用的电泳系统是什么的,有的电泳槽要注意内液比外液高,不然的话就会出现跑的很慢的现象。
3楼2011-04-23 19:55:55
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caojinxuan

银虫 (正式写手)

操作的时候确实内液比外液高
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4楼2011-04-25 09:26:44
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