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woaipan

铜虫 (初入文坛)


[交流] 【求助】急!有木有做过Tricine-SDS-PAGE小分子蛋白电泳的进!

我最近在纯化蛋白,估计纯化得到的蛋白分子量挺小的,低于10kD,想用tricine-sds-page电泳跑一下看看,但是查了资料这种电泳需配置阴极和阳极两种电泳缓冲液,我照着说明配好了,现在不知道如何使用,具体怎么加到电泳槽中。以前做sds-page的时候只需要加一种电泳缓冲液,所以糊涂了。
注:文献中说是阳极电泳液加到底部,阴极的则加在上部。
亟待各位大虾的帮助和解决!
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xifu521

新虫 (初入文坛)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
1257363楼: Originally posted by cicilyok at 2012-04-08 20:53:52:
楼主,请问你在配置3C/6C储备液的时候有没有遇到不溶现象,以及过滤速度极慢的问题?怎么解决的呢,求赐教

我遇到过,一晚上都没有溶解,可以在稍微高一点的温度中水浴一下,立即就溶解了。我当时用的是40摄氏度,你可以低一点,而且要快,不会影响成胶。过滤慢的话只能勤换滤纸,没有别的办法了,看一下是不是没有溶解完全导致的过滤慢。
9楼2012-04-10 18:07:54
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woaipan

铜虫 (初入文坛)


,自己先顶一个,怎么木有人啊~,救命啊
2楼2011-04-16 15:49:16
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mamadexiao

木虫 (正式写手)


woaipan(金币+1): 2011-04-18 15:50:58
我觉得是不是那种中型胶板阿,上下各自装缓冲液的那种
另外,用TRICINE配的胶似乎也可以在一般的缓冲液里跑啊...
3楼2011-04-16 18:13:37
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woaipan

铜虫 (初入文坛)


貌似如果用一般的缓冲液电泳系统还是连续的,tricine好像就是不连续的电泳体系,所以好像必须得用阴阳极的缓冲液!
4楼2011-04-16 19:12:58
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