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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 【求助】急！有木有做过Tricine－SDS－PAGE小分子蛋白电泳的进！
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woaipan

铜虫 (初入文坛)

[交流] 【求助】急！有木有做过Tricine－SDS－PAGE小分子蛋白电泳的进！

我最近在纯化蛋白，估计纯化得到的蛋白分子量挺小的，低于10kD，想用tricine－sds-page电泳跑一下看看，但是查了资料这种电泳需配置阴极和阳极两种电泳缓冲液，我照着说明配好了，现在不知道如何使用，具体怎么加到电泳槽中。以前做sds-page的时候只需要加一种电泳缓冲液，所以糊涂了。
注：文献中说是阳极电泳液加到底部，阴极的则加在上部。
亟待各位大虾的帮助和解决！
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1楼 2011-04-16 15:42:11
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静静秋

木虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
silicare: 金币+5, BioEPI+1, 应助指数+1, 鼓励新虫发帖交流 2013-05-27 10:53:03
我最近在做Tricine胶，和普通胶的区别在于胶的配置方法不同，还有就是需要用阴阳两极缓冲液。可以先用低电压跑30min，然后再用正常电压跑完，注意控制温度，最好放在4℃的冷冻柜里面跑，效果会更好。
染色液和脱色液可以用普通胶的染色液和脱色液，染色和脱色时间不要过长了，染色之前一定要用固定液进行固定，以防小分子弥散了，染色液有很多中，我用的是乙酸铵，楼主可以试试，我跑出来了，条带很清晰
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softcheese
16楼2013-05-27 10:10:51
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woaipan

铜虫 (初入文坛)
，自己先顶一个，怎么木有人啊～，救命啊
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2楼2011-04-16 15:49:16
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mamadexiao

木虫 (正式写手)
woaipan(金币+1): 2011-04-18 15:50:58
我觉得是不是那种中型胶板阿,上下各自装缓冲液的那种
另外,用TRICINE配的胶似乎也可以在一般的缓冲液里跑啊...
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3楼2011-04-16 18:13:37
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woaipan

铜虫 (初入文坛)
貌似如果用一般的缓冲液电泳系统还是连续的，tricine好像就是不连续的电泳体系，所以好像必须得用阴阳极的缓冲液！
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4楼2011-04-16 19:12:58
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