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【求助】急!有木有做过Tricine-SDS-PAGE小分子蛋白电泳的进!
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我最近在纯化蛋白,估计纯化得到的蛋白分子量挺小的,低于10kD,想用tricine-sds-page电泳跑一下看看,但是查了资料这种电泳需配置阴极和阳极两种电泳缓冲液,我照着说明配好了,现在不知道如何使用,具体怎么加到电泳槽中。以前做sds-page的时候只需要加一种电泳缓冲液,所以糊涂了。 注:文献中说是阳极电泳液加到底部,阴极的则加在上部。 亟待各位大虾的帮助和解决! |
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电泳、bio-rad 电转化仪及操作 | 蛋白纯化 |
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我最近在做Tricine胶,和普通胶的区别在于胶的配置方法不同,还有就是需要用阴阳两极缓冲液。可以先用低电压跑30min,然后再用正常电压跑完,注意控制温度,最好放在4℃的冷冻柜里面跑,效果会更好。 染色液和脱色液可以用普通胶的染色液和脱色液,染色和脱色时间不要过长了,染色之前一定要用固定液进行固定,以防小分子弥散了,染色液有很多中,我用的是乙酸铵,楼主可以试试,我跑出来了,条带很清晰 |
16楼2013-05-27 10:10:51
2楼2011-04-16 15:49:16
3楼2011-04-16 18:13:37
4楼2011-04-16 19:12:58










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softcheese
,自己先顶一个,怎么木有人啊~,救命啊
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