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天官赐福

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】质粒的转化体积为什么不能超过感受态的十分之一 已有11人参与

看各个生物试剂公司的感受态说明书上讲,转化的质粒体积不能超过感受态体积的十分之一,初不明缘由,查阅一番,有云“这样是保证感受态细胞过量”。
      既然是想让质粒进入感受太细胞中,为何不是让质粒过量呢?
      小生最近在作酵母双杂交,对于加入的转化质粒的体积是否一如转化大肠杆菌那样?望各位大虾不吝赐教!!!
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td0605

木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2011-04-11 10:31:00:
1、最怕的是多个质粒进入同一个菌,这样就不是“单克隆”了
2、连接buffer中的盐成分可能会影响转化效率

至于其他的因素应该不用考虑太多

多个相同质粒进入同一个菌,因为“质粒不相容性”,多余的质粒最后还是会被排斥出去,最终一个菌里只含有一个质粒。
12楼2011-04-11 14:56:12
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