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xnbioinfor

铜虫 (小有名气)

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[交流] 【求助】T载体转化DH5α，平板上没有斑

平板上只有零星的2、3 个白斑，到底是为什么呢？转化时需要注意什么呢？涂板有什么注意事项吗

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1楼 2011-04-08 12:34:23

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jhu132llh

荣誉版主 (知名作家)

★ ★
xnbioinfor(金币+1):谢谢参与
amisking(金币+1): 鼓励发帖交流。 2011-04-08 19:58:23
看天(EPI+1): 2011-04-09 01:50:20

T载体的连接效率还是很高的
按说不应该出现这个现象
分析一下原因：
1.确保连接没问题
2.DH5a的转化效率没问题，感受态放-80久了效率会降低的
3.这个和先在4度放里一阵可能是会有关系，毕竟转化后是没有经生长激活后在放于4度的。我们的都是转化后先让它长，要是赶上时间不合适就先把在37度培养上6小时以上在放在4度的
4.涂板的时候只要没把菌烫死的话，手法值影响单菌落的重叠，而不会影响菌落的生长的