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xnbioinfor

铜虫 (小有名气)

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[交流] 【求助】T载体转化DH5α，平板上没有斑

平板上只有零星的2、3 个白斑，到底是为什么呢？转化时需要注意什么呢？涂板有什么注意事项吗

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1楼 2011-04-08 12:34:23

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天使托

专家顾问 (职业作家)

★ ★
xnbioinfor(金币+1):谢谢参与
amisking(金币+1): 鼓励发帖交流。 2011-04-08 19:58:14
看天(EPI+1): 2011-04-09 01:50:01

1: DH5α的感受态细胞效率不高。。。可以重新做感受态细胞或者购买
2：转化后你在摇床上摇的时间可以稍微长一些；
3：涂布的时候可以多涂布一些

其实楼主说的可以详细一些，这样方便大家给你解答！

赞一下(3人)

3楼2011-04-08 14:58:54

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查看全部 21 个回答

睡着数绵羊

银虫 (小有名气)

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★
xnbioinfor(金币+1):谢谢参与

说明转化效率不高哦，先挑白斑看看是不是，你的转化体系是多少，涂了多少的菌液。T载体很好连的。

赞一下(1人)

2楼2011-04-08 13:23:51

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xnbioinfor

铜虫 (小有名气)

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引用回帖:

Originally posted by 天使托 at 2011-04-08 14:58:54:
1: DH5α的感受态细胞效率不高。。。可以重新做感受态细胞或者购买
2：转化后你在摇床上摇的时间可以稍微长一些；
3：涂布的时候可以多涂布一些

其实楼主说的可以详细一些，这样方便大家给你解答！

我是上午涂的板子，因为时间不好，就放在4度冰箱，晚上7点半放到37度恒温培养箱里，早上9点看着就没几个斑？是不是放在4度导致的呢？还有就是我涂板用力可能大了些

4楼2011-04-08 16:56:06

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yabxxh

木虫 (正式写手)

★
xnbioinfor(金币+1):谢谢参与

这个和感受态，你片段的浓度以及感受态都有关系，另外蓝白斑筛选没必要用，假阳性很高，热激前后不要动摇管，复苏转速可以小一点，170rpm左右，好运

赞一下(1人)

5楼2011-04-08 16:59:19

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

查看全部 21 个回答

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