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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】关于Westrn blot
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烂铁

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】关于Westrn blot 已有8人参与

我又一个问题不懂，想问问大家：
一般做Western blot的二抗可以通用么？我的抗原位点是6*His，上海生工告诉我说“其二抗是以一抗为基础（抗原）免疫动物，得到二抗。”所以可不可以用其他的抗原位点的二抗来做6*His的Western blot呢？
谢谢了！
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看见你开心我会不禁微笑，想起你伤心我会暗暗心疼。
1楼 2011-04-08 09:55:43
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

xuguanghai

木虫 (职业作家)
★ ★ ★
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西瓜(金币+2): 鼓励交流 2011-04-28 09:04:44
你一抗选择“某某动物1抗HIS的抗体”，二抗就选择“某某动物2抗某某动物1的抗体HRP”
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9楼2011-04-28 08:50:00
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普通回帖

gyq625

新虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
一般不都是辣根过氧化酶标记的二抗吗，我也是做western的，上周也打电话咨询了上海生工的公司，他们说他们那有
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2楼2011-04-08 12:11:14
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gyq625

新虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
不好意思出了点问题，我打电话过去他们western负责人说，他们那有western blot的试剂盒啊，里面二抗什么的都有的，他还说二抗是通用的，买此试剂盒的只需自筹一抗。。。所以，对你提出的疑问表示同问，等待有识之士答疑解惑
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3楼2011-04-08 12:14:43
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yixinling

金虫 (正式写手)
★ ★ ★
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amisking(金币+2): 鼓励发帖交流。 2011-04-08 20:03:06
引用回帖:
Originally posted by 烂铁 at 2011-04-08 09:55:43:
我又一个问题不懂，想问问大家：
一般做Western blot的二抗可以通用么？我的抗原位点是6*His，上海生工告诉我说“其二抗是以一抗为基础（抗原）免疫动物，得到二抗。”所以可不可以用其他的抗原位点的二抗来做6* ...

一抗是什么动物的啊？
二抗总得是抗这个动物的才行啊。
抗原位点不同只要你的一抗上有其他的位点就没问题。
就怕没有哈，所以其实你这个问题不见得不行，但最好不要这么玩。
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4楼2011-04-08 15:23:15
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ujsyangyong

铁杆木虫 (著名写手)
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西瓜(金币+3): 鼓励交流 2011-04-10 19:14:38
二抗是与一抗结合的，一抗种类繁多，二抗种类却有限，一般有抗小鼠、抗兔、抗羊等，只分种属，具体选择什么类型的二抗，要根据你的一抗动物源性选择，如一抗为兔抗his多克隆抗体，则二抗选择抗兔的HRP标记二抗即可，同理，如一抗为小鼠抗his单克隆抗体，则二抗选择抗小鼠HRP标记二抗。
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实验，实验，还是实验！
5楼2011-04-10 11:41:49
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75372017

木虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
二抗主要就是根据一抗来源来选择。。。我做了很多，二抗就那几种。或者你可以选择直标抗体，就不用为选二抗烦恼了
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6楼2011-04-10 17:29:17
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cmtoon

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by ujsyangyong at 2011-04-10 11:41:49:
二抗是与一抗结合的，一抗种类繁多，二抗种类却有限，一般有抗小鼠、抗兔、抗羊等，只分种属，具体选择什么类型的二抗，要根据你的一抗动物源性选择，如一抗为兔抗his多克隆抗体，则二抗选择抗兔的HRP标记二抗即可 ...

正解。
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7楼2011-04-10 18:34:04
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luohuacheng

新虫 (小有名气)
★
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根据一抗，选择二抗。
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8楼2011-04-27 22:15:31
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wutongyu77

铜虫 (初入文坛)
★
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请问楼主个问题
     您的WB结果肯定做出来了吧，我想做WB，但是我没有针对我的精氨酸激酶基因的特异性抗体，那我该怎么办？
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选择好自己要走的路，走好自己所选择的路
10楼2011-05-24 19:34:09
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