应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

CyRhmU.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】定点突变酶切之后出问题，请教高手~~~~！！！
51/1返回列表
查看: 1933  |  回复: 13
只看楼主@他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

maggiell

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】定点突变酶切之后出问题，请教高手~~~~！！！

我刚开始做定点突变，在PCR扩增之后出来的电泳条带是正确的，4000多bp，但是用 DpnI酶切之后的到得电泳条带就出问题了，居然跑到1000bp多去了。问了师姐，他说的得到的条带应该跟原来的差不多才对，我重复做了两三次，得到的结果都是一样的。其中有一次还做了个对照组，很奇怪，在酶切之后对照组中的模板条练居然也还能跑出来（按理说，对照组应该不出线条带才对呀。），结果跟上面说的差不多，，都是在1000多。我实在不明白啊，请前辈们帮我解解疑惑吧！！！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼2011-04-07 09:56:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

夏菡小屋

金虫 (正式写手)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
dhd997(金币+2): 可以引用回复，这样会给虫友一个提示，方便他看到及时回复你。 2011-04-20 08:29:48
我最近也在做定点突变，但是pcr出来后都没有预期的条带，大概都是1500到2000左右，请问你用的是什么pcr
赞一下(2人) 回复此楼
11楼2011-04-19 22:32:56
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 14 个回答

tangbohejin

木虫之王 (文学泰斗)
★
maggiell(金币+4):谢谢参与
maggiell(金币+1): 谢谢 2011-04-07 10:21:01
系统误差考虑考虑。。
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2011-04-07 10:07:40
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

amilie030312

金虫 (正式写手)
★
maggiell(金币+4):谢谢参与
maggiell(金币+1): 2011-04-07 11:49:45
DpnI用的哪个公司的啊，扔了换个好点公司的酶吧，估计是被酶里面的污染给切碎了吧。
赞一下(2人) 回复此楼
3楼2011-04-07 11:18:12
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

西瓜

荣誉版主 (知名作家)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
1949stone(金币+2): 鼓励 2011-04-07 14:01:47
可能你的PCR产物里含有其他Dpn I酶切位点。不如再检查一遍序列的酶切位点？
赞一下(2人) 回复此楼
4楼2011-04-07 12:41:33
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 14 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复(可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭