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xnbioinfor

铜虫 (小有名气)


[交流] 【求助】高保真的taq酶 怎么才能产生polyA尾巴

买了takara的高保真Taq酶 ,但是PCR只能产生平末端产物,连不到T载体上, 怎么才能让PCR产生polyA尾巴呢?
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★ ★ ★
xnbioinfor(金币+1):谢谢参与
看天(金币+2): 鼓励回答 2011-04-06 18:21:55
可以使用平端克隆试剂盒

也可以纯化PCR产物后加点Taq酶72度孵育10min,再纯化后连接

当然,中间跳掉两次纯化也是可以的,但是TA克隆效率会低一些,具体低多少没有试过
3楼2011-04-06 14:54:04
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lywinan

捐助贵宾 (职业作家)



xnbioinfor(金币+1):谢谢参与
加一点普通Taq酶,再延伸一段时间
2楼2011-04-06 14:52:56
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yabxxh

木虫 (正式写手)


★ ★ ★
xnbioinfor(金币+1):谢谢参与
看天(金币+2): 鼓励分享 2011-04-06 18:22:10
我觉得还是全式金的peasyblunt好一点,还配有感受态,以前买的加A反应液都被我丢掉了,怎么感觉有点像广告?呵呵
4楼2011-04-06 14:57:39
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zgb1982

木虫 (正式写手)



xnbioinfor(金币+1):谢谢参与
楼上几位都回答了
5楼2011-04-06 16:08:04
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