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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 【求助/交流】分离产蛋白酶菌株
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nancyyazi

铜虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】分离产蛋白酶菌株

我想从海水中分离产蛋白酶的菌株，现在有两个方案，不知道哪个更合理。
1、将不同稀释度的海水涂布在2116E培养基，先从海水中分离出不同的菌株，然后将这些菌株分别点种于酪蛋白琼脂培养基上，测量菌落直径以及透明圈直径，最后对分泌蛋白酶的菌株进行鉴定。
2、直接将不同稀释梯度的海水涂布于酪蛋白琼脂培养基，测量菌落直径以及透明圈直径，对菌株进行鉴定。
这两个方法哪个写论文的时候更合理？


我现在是用的海水配制的培养基，可是我们学校这边的海水不是很清澈，用滤纸过滤还是有些浑浊，离心一下是很清澈，但这样会不会把一些营养物质除去了？还有就是我用酪蛋白琼脂筛选出来的菌株，在不同的平板上很可能筛选到的是同一种菌，我怎么鉴定它们是不是同一种？我看了一些文章说从海水中分离出来多少多少株菌，其中有多少株有什么什么酶活性，我是要对我分离出来的每个菌都进行鉴定吗？那样工作量会很大。

[ Last edited by nancyyazi on 2011-4-6 at 19:25 ]
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1楼 2011-04-05 20:02:56
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kerry2011

新虫 (初入文坛)
★
nancyyazi(金币+1):谢谢参与
nancyyazi(金币+3): 2011-04-06 18:12:04
我曾经的课题是  从海水样品中筛选尽量多样的细菌，顺便筛一下产蛋白酶的菌株。我的做法是：在2216E培养基中加入0.5 %的脱脂牛奶，这样，培养基即适合尽量多的细菌生长，同时蛋白酶水解能力从水解圈中一目了然。
仅供参考。
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5楼2011-04-06 09:09:36
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kerry2011

新虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by nancyyazi at 2011-04-06 19:29:31:
直接在2116E里面加酪蛋白可以吗？

我们用的是人工海水，我们一般采取基本培养基和酪蛋白分别灭菌，之后混合的方法。
赞一下(2人) 回复此楼
13楼2011-04-07 10:30:18
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kerry2011

新虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by kerry2011 at 2011-04-07 10:30:18:
我们用的是人工海水，我们一般采取基本培养基和酪蛋白分别灭菌，之后混合的方法。

例如配100 ml培养基，我们的做法是：
用大约<=1 ml 的1 M NaOH浸润一下干酪素, 之后加入10 ml 左右的去离子水，加热溶解干酪素，加热后水分会少些，定容至10 ml，调pH为7.5，装入试管中待灭菌。配90 ml 2216E 固体培养基，调pH为7.5，入三角瓶，灭菌；灭完后凉至50°左右将两者混合，倒平板即可。
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15楼2011-04-08 17:02:18
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