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【求助/交流】两条序列只有1-2个变异位点,能设计特异引物区别出来吗?
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hexf
木虫
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[交流]
【求助/交流】两条序列只有1-2个变异位点,能设计特异引物区别出来吗?
RT
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Last edited by 1949stone on 2011-4-2 at 10:54
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2011-04-01 23:00:23
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hexf(金币
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):谢谢参与
dhd997(金币+3): good 2011-04-04 08:29:48
做HRM,单碱基的话480和rotor-gene可区分~~~两个的话7500之类的也可以了。虽然7500做单碱基或许也可以~
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16楼
2011-04-03 15:41:14
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西瓜
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hexf(金币+1): 同求同求 2011-04-02 09:08:08
1949stone(金币+1): 鼓励 2011-04-02 10:54:54
我试过用PCR鉴定一个单个碱基突变的基因,效果不好,对照和突变体都能扩增出来……
顶一顶
求高人解答,呵呵~
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2011-04-01 23:39:49
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hexf(金币+1): 酶切位点的方法已用过,所以想用PCR来分 2011-04-02 09:08:56
1949stone(金币+1): 是个办法 2011-04-02 10:55:06
楼主可以试试有没有酶切位点识别這个序列
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2011-04-02 08:37:07
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shaquila
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hexf(金币+3): 2011-04-02 09:07:42
1949stone(金币+2): 最好分开调 2011-04-02 10:55:28
如果要设计引物,要保证一条引物的三端在这个碱基上,引物要短,降低镁离子浓度,试试最高的退火温度
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2011-04-02 08:40:06
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2011-04-02 12:47
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dhd997
at 2011-04-02 12:26:45: 开始搞专业的了
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