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yangxicshe

铁虫 (小有名气)

[交流] 【求助】液相测试 峰型出现问题,怎么办? 已有4人参与

凝胶色谱柱的前伸
在高效液相色谱以上使用凝胶色谱柱,分离多聚体、二聚体、单体峰,280nm检测
进样多次后,柱子的开始前伸,请问有什么可以解决的方法去清洗柱子,可以改变峰型?
用的流动相是磷酸盐缓冲液(磷酸二氢钠+磷酸氢二钠+异丙醇)

用的流动相:含1%的异丙醇的pH7.0、0.2mol/L磷酸盐缓冲液
样品用的稀释液也是流动相
流速0.6ml/min
用的色谱柱是TOSOH的凝胶柱(柱直径7.5mm,长60cm,粒度10微米)
再请教,凝胶色谱柱测人血白蛋白,浓度12mg/ml,用凝胶柱的使用寿命一般为多少针?
如果柱效和拖尾因子不好还有方法冲洗吗?
自己一般使用的柱子保存液为0.05%叠氮钠

请教大家!!

[ Last edited by yangxicshe on 2011-4-1 at 18:17 ]
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巧巧米

银虫 (初入文坛)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
请教楼主,我现在在做凝胶色谱,测多聚体含量,不知要怎么做方法学验证,因为得不到多聚体杂质。在此先谢过了。
努力往前冲,只要不违背自己的原则,始终会有一片蓝天等候着你。。。。。
4楼2011-04-18 13:27:43
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News

专家顾问 (职业作家)

没碰过!祝福!
水滴石穿!!
2楼2011-04-01 11:16:53
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zerot

新虫 (初入文坛)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
4楼: Originally posted by 巧巧米 at 2011-04-18 13:27:43:
请教楼主,我现在在做凝胶色谱,测多聚体含量,不知要怎么做方法学验证,因为得不到多聚体杂质。在此先谢过了。

请问你有遇到连续进样,同一个样品峰面积差很多的情况吗?针对方法学验证要怎么做,药审中心有一篇相关文章,你可以参考一下。
5楼2011-09-21 09:44:19
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巧巧米

银虫 (初入文坛)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
5楼: Originally posted by zerot at 2011-09-21 09:44:19:
请问你有遇到连续进样,同一个样品峰面积差很多的情况吗?针对方法学验证要怎么做,药审中心有一篇相关文章,你可以参考一下。

没有,重现性还不错,请问能给我那篇文章的链接地址吗?或者方便的话,能传到网上吗?
努力往前冲,只要不违背自己的原则,始终会有一片蓝天等候着你。。。。。
6楼2011-09-21 10:21:25
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