| 查看: 6146 | 回复: 8 | ||||
| 本帖产生 1 个 MolEPI ，点击这里进行查看 | ||||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||||
[交流]
【求助/交流】荧光定量PCR与半定量的RT－PCR在设计引物时有什么区别？
|
||||
| 荧光定量PCR与半定量的RT－PCR在设计引物时有什么区别？它们的产物在要求上有什么不同。谢谢！此外在NCBI中查的的序列ORIGIN后面跟是full cDNA sequence还是其它的序列？ |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 核酸生物学实验经验 |
» 猜你喜欢
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有81人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
-
氢氧化钾活化操作
已经有18人回复
-
散金
已经有68人回复
-
生物质超级电容器
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 求高手指点：RT-PCR的引物设计
已经有18人回复
- RT-PCR引物设计
已经有8人回复
- 【分享】实时定量PCR引物探针设计必备软件【已搜索无重复】
已经有14人回复
- 荧光定量PCR与普通PCR产物不一样？
已经有6人回复
- 做RT-PCR时该用哪段氨基酸序列设计引物
已经有6人回复
- 半定量实时PCR的引物可以做普通PCR的引物吗？
已经有2人回复
- 【求助/交流】荧光定量PCR引物跨内含子的问题
已经有9人回复
- 【求助/交流】关于RT-PCR引物设计
已经有9人回复
- 【求助/交流】Real time RT-PCR 引物设计问题（高悬赏请高手帮忙）
已经有28人回复
» 抢金币啦！回帖就可以得到:
-
【征稿中！】2026年机械、制造技术与材料国际会议 (MEMTM 2026)
+1/931
-
【IEEE列表会议征稿 】2026年第六届控制理论与应用国际会议（ICoCTA 2026）
+5/890
-
云南大学丁军桥团队2027年博士招生
+1/811
-
基金高中！
+1/598
-
优质男征女友
+1/471
-
昆明理工大学智能车辆技术团队招聘博士后
+3/225
-
锡基钙钛矿｜超低水氧惰性环境，解锁无铅光伏技术攻关路径
+1/100
-
天平合规性问题
+1/93
-
【半导体薄膜代工】ALD/CVD/磁控溅射/热蒸发全工艺
+1/88
-
南方科技大学刘科院士团队诚聘矿物浮选分离方向研究助理
+1/86
-
山东大学-山东字节信息智能技术实验室2026年招聘博士后
+2/24
-
浙江大学物理高等研究院袁怀洋课题组诚聘博士和博士后
+1/19
-
评职称需要，卖发明专利了:D有技术储备需求的设备厂商可联系
+1/19
-
中国药科大学陈达威课题组招收2027年博士研究生 （药理学）
+1/19
-
义翘神州推出全长p-Tau217蛋白，助力阿尔茨海默病下一代生物标志物检测开发
+1/9
-
义翘神州TR-FRET激酶检测试剂盒助力高通量药物筛选
+1/3
-
航空发动机气动热力学仿真该怎么配工作站？从压气机叶片到整机全环的算力需求拆解
+1/3
-
义翘神州TR-FRET激酶检测试剂盒助力高通量药物筛选
+1/3
-
项目助理招聘启事
+1/2
-
中国科学院广州生物医药与健康研究院课题组招收博士研究生1名（2027年9月入学）
+1/1
6楼2012-07-05 12:02:08
2楼2011-04-01 09:19:15
★ ★ ★
1949stone(金币+3, EPI+1): 学习一下 2011-04-01 11:24:30
biofeixue(金币+2): 2011-04-01 12:18:08
1949stone(金币+3, EPI+1): 学习一下 2011-04-01 11:24:30
biofeixue(金币+2): 2011-04-01 12:18:08
|
荧光定量PCR的产物不宜过长，否则会由于反应体系的过快消耗而得不到有效扩增，使反应偏离2的N次方的理论方程，这样通过方程推演进行的定量自然就不准确了。产物的大小，综合各家说法，从100 bp到150 bp比较合适，不过这范围也可以放宽到80 bp到300 bp。 荧光定量PCR如果是Sybr Green一类的方法，因为荧光染料会非特异地与双链DNA结合，包括错配产物、引物二聚体等，都会产生荧光信号干扰结果，所以引物的特异性要好，并且不要形成二聚体。 半定量看的是终产物，对于扩增长度的要求貌似没啥要求把？不确定。因为半定量的结果是从胶上看的，产物与引物二聚体的条带是可以区分开的，所以二聚体的影响就没那么严重。 其他的都差不多啦，总之就是荧光定量PCR对引物的要求比半定量要高点。 |
3楼2011-04-01 11:23:08
biofeixue(金币+1): 谢谢! 2011-04-01 12:19:25
晕，楼主问题才回答一般就出EPI了 ORIGIN后面的序列是全部序列，具体看你查的序列是啥玩意了。 如果是基因组测序的cosmid的序列，如”Caenorhabditis elegans Cosmid F52D10, complete sequence“，那就不仅含有多个基因的序列，还包括cosmid本身的序列。 如果是“Caenorhabditis elegans chromosome III, complete sequence”，那就是整个染色体的序列了…… 像“Caenorhabditis elegans insulin receptor homolog (daf-2) mRNA, complete cds”，指的是mRNA的序列。 另外，在序列开头的信息里还会有类似信息 FEATURES Location/Qualifiers source 1..5817 /organism="Caenorhabditis elegans" /mol_type="mRNA" /strain="Bristol N2" /db_xref="taxon:6239" 如 “/mol_type=”这一栏会告诉你整个序列是哪一类分子的。 好像还是没有回答楼主的问题呢。不如你给个链接，我们再帮你看看。 |
4楼2011-04-01 11:55:40
